F9

A linhagem celular F9, um modelo de carcinoma embrionário murino derivado de um teratoma testicular de camundongos C57BL/6, serve como uma importante ferramenta na biologia do desenvolvimento e na embriologia. As células F9 são capazes de se diferenciar em endoderma parietal quando expostas ao ácido retinóico e ao dibutiril-AMP cíclico (cAMP). Essa diferenciação é marcada por mudanças significativas no comportamento celular e na expressão de proteínas, incluindo a síntese do ativador do plasminogênio, da laminina e do colágeno tipo IV. Essas proteínas são cruciais para a compreensão dos processos de desenvolvimento tecidual e formação da matriz nos estágios embrionários iniciais.

Observa-se que a eficácia do AMPc na indução da diferenciação das células F9 depende do tratamento prévio com ácido retinóico, indicando uma interação complexa entre essas moléculas de sinalização no desencadeamento de vias de desenvolvimento. Além disso, as células F9 são caracterizadas por possuírem três cópias do gene da integrina beta 1, o que pode influenciar a adesão e a mobilidade celular, ressaltando ainda mais sua utilidade no estudo das interações celulares e da composição da matriz extracelular. O perfil de segurança dessas células inclui testes para o vírus da ectromelia (varíola do camundongo), para o qual elas apresentaram resultado negativo, garantindo sua adequação para uma ampla gama de aplicações experimentais sem o risco de contaminação viral.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.