Skip to content
F9
Tissue
อัณฑะ
Disease
มะเร็งชนิดเทอร์ราโตคาร์ซิโนมา

Documents

F9

Cell line · Product number 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ F9 ซึ่งเป็นแบบจำลองมะเร็งของตัวอ่อนหนูที่ได้มาจากเทอราโตมาของอัณฑะของหนูสายพันธุ์ C57BL/6 เป็นเครื่องมือสำคัญในชีววิทยาพัฒนาการและวิทยาตัวอ่อนเซลล์ F9 สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเยื่อบุผนังด้านในเมื่อได้รับกรดเรติโนอิกและไดบิวทิลริลไซคลิก AMP (cAMP) การเปลี่ยนแปลงนี้แสดงออกโดยการเปลี่ยนแปลงพฤติกรรมของเซลล์และการแสดงออกของโปรตีนอย่างมีนัยสำคัญ รวมถึงการสังเคราะห์พลาสมินเจนแอคติเวเตอร์ ลามินิน และคอลลาเจนชนิดที่ 4 โปรตีนเหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจกระบวนการพัฒนาเนื้อเยื่อและการสร้างเมทริกซ์ในระยะเริ่มต้นของตัวอ่อน

มีการสังเกตว่าประสิทธิภาพของ cAMP ในการเหนี่ยวนำการแยกตัวในเซลล์ F9 ขึ้นอยู่กับการรักษาด้วยกรดเรติโนอิกก่อนหน้า ซึ่งบ่งชี้ถึงปฏิสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างโมเลกุลสัญญาณเหล่านี้ในการกระตุ้นเส้นทางพัฒนาการ นอกจากนี้ เซลล์ F9 มีลักษณะเด่นคือมียีนเบต้า 1 อินทิกรินสามชุด ซึ่งอาจส่งผลต่อการยึดเกาะและการเคลื่อนที่ของเซลล์ ซึ่งเน้นย้ำถึงประโยชน์ของเซลล์เหล่านี้ในการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์และองค์ประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์การประเมินความปลอดภัยของเซลล์เหล่านี้รวมถึงการทดสอบไวรัสเอคโตรเมเลีย (ฝีดาษหนู) ซึ่งผลการทดสอบเป็นลบ ทำให้มั่นใจได้ว่าเซลล์เหล่านี้มีความเหมาะสมสำหรับการใช้งานทดลองที่หลากหลายโดยไม่มีความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนไวรัส

Tissue
อัณฑะ
Disease
มะเร็งชนิดเทอร์ราโตคาร์ซิโนมา

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
F9 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400174)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0259

05Expression and susceptibility

Viruses
ผลการทดสอบ MAP เป็นลบ: เซนได, เอคโทรเมเลีย, โพลิโอมา, เค-ไวรัส, คิลแฮม, เรโอ 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, ไธเลอร์ GD VII, ทูลแลน H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, เอ็ม-อะดีโนไวรัส, บี.พิลิฟอร์มิส.
Products
พลาสมินเจนแอคติเวเตอร์, ลามินิน, คอลลาเจนชนิดที่สี่

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
เคลือบขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ด้วยเจลาติน 1 x 104 เซลล์/ซม. จะได้ชั้นเซลล์ที่หนาแน่นในเวลาประมาณ 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
129/Sv
Donor age
เอ็มบริโอ