.jpg)
- Tissue
- Gástrico
- Disease
- Adenocarcinoma gástrico
- Metastatic site
- Nódulo linfático
- Synonyms
- HGC 27, HGC27
Documents
01General information
- Description
A HGC-27 é uma linhagem celular de carcinoma gástrico humano derivada do local metastático de um paciente adulto. A linhagem celular apresenta morfologia epitelial e é comumente utilizada no estudo da patogênese do câncer gástrico e das respostas celulares a diversos agentes quimioterápicos. As células HGC-27 têm sido utilizadas em inúmeros estudos para investigar os mecanismos de proliferação, apoptose e metástase das células cancerosas. Elas servem como um modelo valioso para a compreensão das complexas interações moleculares e vias envolvidas no câncer gástrico, incluindo a resposta a compostos terapêuticos e a investigação de novos alvos farmacológicos.
Essas células também são fundamentais no estudo do papel de várias modificações genéticas e epigenéticas na progressão do câncer gástrico. Pesquisas utilizando a HGC-27 contribuíram para o entendimento de processos celulares como a transição epitelial-mesenquimal (EMT), um evento crítico na metástase do câncer. Além disso, a linhagem celular tem sido utilizada para explorar as vias de sinalização dos receptores e seu impacto no comportamento das células cancerosas, fornecendo dados cruciais para o desenvolvimento de terapias direcionadas. De modo geral, a HGC-27 é uma ferramenta importante para o avanço da pesquisa sobre o câncer gástrico, ajudando a abrir caminho para novas estratégias terapêuticas e aprimorando nossa compreensão dos mecanismos da doença.
- Tissue
- Gástrico
- Disease
- Adenocarcinoma gástrico
- Metastatic site
- Nódulo linfático
- Synonyms
- HGC 27
- HGC27
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De aparência epitelial, poligonal ou em forma de fuso curto
- Tumourigenic
- Sim
- Doubling time
- 17 horas
04Identifiers
- Citation
- HGC-27 (número de catálogo da Cytion 300436)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1279
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 negativo
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 1 a 2 x 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Inicie a cultura a partir do criotubo com uma densidade celular de 2 a 3 × 10⁴ células/cm². As células se recuperarão em 24 a 48 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- Não especificado
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes