HT-1376

A linhagem celular HT-1376 é derivada de um carcinoma de bexiga humano, especificamente um carcinoma de células transicionais de grau 3. Essa linhagem celular foi estabelecida a partir de um tumor obtido por meio de ressecção transuretral em uma paciente adulta que apresentava histórico de carcinoma invasivo de bexiga. As células HT-1376 apresentam características epiteliais, incluindo a presença de microvilosidades e tonofibrilas, o que indica sua origem epitelial. Além disso, essas células exibem vários cromossomos marcadores, o que as distingue de outras linhagens celulares tumorais conhecidas. Sabe-se também que as células HT-1376 crescem em ágar mole e são altamente tumorigênicas, formando tumores quando injetadas em camundongos e hamsters imunocomprometidos.

A linha HT-1376 é importante na pesquisa do câncer de bexiga devido ao seu perfil genético, que inclui alterações notáveis na região cromossômica 9p21. Essa região frequentemente sofre grandes deleções homozigotas, levando à inativação de genes supressores de tumor essenciais, como CDKN2, CDKN2B e MTAP. Essas deleções são comuns no câncer de bexiga e são cruciais para a compreensão dos mecanismos moleculares subjacentes à tumorigênese. Por exemplo, a perda de CDKN2 e CDKN2B está associada à desregulação do ciclo celular, que é um evento-chave na progressão do câncer. Além disso, as células HT-1376 têm sido estudadas quanto à expressão da proteína p16, um produto do gene CDKN2, que frequentemente está correlacionada com a ausência de expressão de pRb, outra proteína supressora de tumor.

A linhagem celular HT-1376 também tem sido utilizada em pesquisas virológicas para avaliar a presença de vírus tumorais, embora nenhuma expressão viral tenha sido detectada nessas células. Isso torna a HT-1376 um modelo valioso para o estudo dos mecanismos não virais do desenvolvimento e da progressão do câncer de bexiga. As alterações genéticas da linhagem celular e sua capacidade de crescer in vitro e in vivo proporcionam uma plataforma robusta para estudos pré-clínicos, incluindo testes de medicamentos e a exploração de novas estratégias terapêuticas direcionadas a vias genéticas específicas no câncer de bexiga.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.