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- Tissue
- Pele
- Disease
- Papiloma da pele do camundongo
- Synonyms
- KERA-308, 308, Line 308
Documents
Kera-308
Cell line · Product number 400429
The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...
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01General information
- Description
A linhagem celular Kera-308, estabelecida a partir de queratinócitos da pele de camundongos adultos, oferece um modelo versátil para o estudo dos complexos processos da fisiologia da pele, particularmente a cicatrização de feridas e a função dos queratinócitos. Essa linha celular demonstra uma notável capacidade de aumentar a expressão de queratina, incluindo tipos de queratina induzidos por feridas, como a Krt6a, sob condições específicas, como o tratamento com extrato de raiz de Morus alba. A capacidade de resposta das células Kera-308 ao 12-miristato-13-acetato de forbol (PMA) destaca sua utilidade na investigação dos mecanismos celulares subjacentes à reparação e regeneração da pele.
Uma característica marcante das células Kera-308 é sua resposta de proliferação dependente da dose, que pode ser significativamente potencializada por estímulos externos, como o extrato da raiz de Morus alba. Essa característica torna as células Kera-308 uma excelente ferramenta para investigar os fundamentos moleculares da proliferação e diferenciação dos queratinócitos em resposta a agentes terapêuticos.
Além disso, o perfil transcricional das células Kera-308 em cenários de cicatrização de feridas, particularmente a regulação positiva dos filamentos de queratina e da sinalização CXCL12/CXCR4, fornece insights inestimáveis sobre a dinâmica celular e molecular envolvida durante a reparação da pele. O envolvimento dessas vias de sinalização ressalta a relevância das células Kera-308 na exploração de novas estratégias terapêuticas para melhorar a cicatrização de feridas e tratar doenças da pele.
- Tissue
- Pele
- Disease
- Papiloma da pele do camundongo
- Synonyms
- KERA-308
- 308
- Line 308
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- Queratinócito
04Identifiers
- Citation
- Kera-308 (número de catálogo da Cytion 400429)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5782
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- TrypLE Express (Life Technologies)
- Subculturing
- Remova o meio e enxágue as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (3 a 5 ml de PBS para frascos de cultura celular T25, 5 a 10 ml para frascos T75). Adicione Tryple Express (1–2 ml por frasco de cultura celular T25, 2,5 ml por frasco T75); a camada celular deve ficar totalmente coberta. Incube a 37 graus por 15 minutos. Ressuspender cuidadosamente as células com 10 ml de meio (use um raspador de células, se necessário), centrifugar por 5 minutos a 300xg, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos contendo meio fresco.
- Seeding density
- 1 x 104 células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
07Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
08Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Disclaimer
- Nossas células são fornecidas exclusivamente para fins de pesquisa laboratorial in vitro e não se destinam ao uso clínico ou diagnóstico, nem devem ser administradas a seres humanos ou utilizadas para fins veterinários. Os usuários devem cumprir todas as diretrizes e regulamentações aplicáveis ao manuseio e uso dessas células em um ambiente de pesquisa.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes