Skip to content
Kera-308
Tissue
ผิวหนัง
Disease
หูดของผิวหนังหนู
Synonyms
KERA-308, 308, Line 308

Documents

Kera-308

Cell line · Product number 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ Kera-308 ซึ่งสร้างขึ้นจากเซลล์เคอราติโนไซต์ของผิวหนังหนูโตเต็มวัย เป็นแบบจำลองที่มีความหลากหลายสำหรับการศึกษาขั้นตอนที่ซับซ้อนของสรีรวิทยาผิวหนัง โดยเฉพาะการหายของแผลและการทำงานของเซลล์เคอราติโนไซต์ เซลล์ไลน์นี้แสดงให้เห็นถึงความสามารถที่น่าทึ่งในการเพิ่มการแสดงออกของเคอราติน รวมถึงเคอราตินชนิดที่เกิดจากการบาดเจ็บ เช่น Krt6a ภายใต้เงื่อนไขเฉพาะ เช่น การรักษาด้วยสารสกัดจากรากของต้นหม่อน (Morus alba)การตอบสนองของเซลล์ Kera-308 ต่อฟอโบล 12-ไมริสเตต 13-อะซีเตท (PMA) แสดงให้เห็นถึงประโยชน์ของเซลล์เหล่านี้ในการศึกษาวิถีเซลล์ที่อยู่เบื้องหลังการซ่อมแซมและการสร้างผิวหนังใหม่

คุณสมบัติที่โดดเด่นของเซลล์ Kera-308 คือการตอบสนองต่อการเพิ่มจำนวนที่ขึ้นกับปริมาณของสารกระตุ้น ซึ่งสามารถเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อได้รับสิ่งกระตุ้นภายนอก เช่น สารสกัดจากรากต้นหม่อน (Morus alba) ลักษณะนี้ทำให้ Kera-308 เป็นเครื่องมือที่ยอดเยี่ยมในการศึกษาพื้นฐานระดับโมเลกุลของการเพิ่มจำนวนและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เคราติโนไซต์ (keratinocyte) ในการตอบสนองต่อสารบำบัดต่าง ๆ

นอกจากนี้ โปรไฟล์การถอดรหัสของเซลล์ Kera-308 ในสถานการณ์การสมานแผล โดยเฉพาะการเพิ่มขึ้นของเส้นใยเคราตินและการส่งสัญญาณ CXCL12/CXCR4 ให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีค่าอย่างยิ่งเกี่ยวกับพลวัตของเซลล์และโมเลกุลที่เกิดขึ้นระหว่างการซ่อมแซมผิวหนัง การมีส่วนร่วมของเส้นทางการส่งสัญญาณเหล่านี้เน้นย้ำถึงความสำคัญของเซลล์ Kera-308 ในการสำรวจกลยุทธ์การรักษาใหม่ๆ เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการสมานแผลและรักษาความผิดปกติของผิวหนัง

Tissue
ผิวหนัง
Disease
หูดของผิวหนังหนู
Synonyms
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
เคราติโนไซต์

04Identifiers

Citation
Kera-308 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400429)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5782

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
TrypLE Express (ไลฟ์ เทคโนโลยีส์)
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์ออกจากขวดและล้างเซลล์ที่ติดอยู่ด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (3-5 มล. สำหรับขวด T25, 5-10 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75) เติม Tryple Express (1-2 มล. ต่อขวด T25, 2.5 มล. ต่อขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75) ให้แผ่นเซลล์ถูกปกคลุมอย่างทั่วถึง ทำการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศา เป็นเวลา 15 นาทีแขวนเซลล์ให้ละลายอย่างระมัดระวังด้วยน้ำยาเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตร (หากจำเป็นให้ใช้เครื่องขูดเซลล์) หมุนเหวี่ยงที่ 300xg เป็นเวลา 5 นาที แขวนเซลล์ให้ละลายในน้ำยาเลี้ยงเซลล์ใหม่ และแบ่งใส่ลงในขวดใหม่ที่มีน้ำยาเลี้ยงเซลล์ใหม่
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c