
- Tissue
- Ovário
- Disease
- Adenocarcinoma de ovário
- Synonyms
- OVCAR 8, NIH:OVCAR-8, OVCAR8, Ovcar8, OVCAR.8, OVCA8, OVCAR-8/EGFP_LC3
Documents
01General information
- Description
A OVCAR-8 é uma linhagem celular de carcinoma de ovário humano isolada de uma paciente com adenocarcinoma de ovário em estágio avançado. Essa linhagem celular é particularmente conhecida por sua significativa resistência à cisplatina e à carboplatina, que foram administradas em altas doses durante o tratamento da paciente. A OVCAR-8 é amplamente utilizada em pesquisas que investigam os mecanismos de quimiorresistência no câncer de ovário, bem como no desenvolvimento de estratégias para superar a resistência às quimioterapias à base de platina.
As células OVCAR-8 apresentam morfologia epitelial e crescem de forma aderente em cultura. A linhagem celular é caracterizada por traços moleculares e fenotípicos associados a cânceres de ovário de alto grau, incluindo alterações nos mecanismos de reparo de danos ao DNA e outras vias que contribuem para a sobrevivência do tumor sob estresse quimioterápico. Ao contrário de algumas outras linhagens celulares de câncer de ovário, a OVCAR-8 não apresenta expressão detectável de metalotioneína, uma proteína que se acredita desempenhar um papel na resistência a medicamentos à base de metais pesados. No entanto, essa linhagem celular demonstra resistência cruzada ao cádmio e a outros agentes, sugerindo o envolvimento de mecanismos alternativos de resistência, como níveis elevados de glutationa e maior capacidade de reparo do DNA.
A OVCAR-8 é uma ferramenta valiosa na pesquisa pré-clínica para a triagem de agentes quimioterápicos, a avaliação de terapias direcionadas e o estudo da biologia da quimiorresistência. Pesquisadores utilizam essa linhagem celular para explorar combinações de medicamentos destinadas a sensibilizar tumores resistentes aos tratamentos padrão. Além disso, a OVCAR-8 fornece insights sobre as adaptações genéticas e moleculares das células do câncer de ovário que estão na base de sua sobrevivência e persistência, apesar de regimes agressivos de quimioterapia. Sua relevância clínica e seu perfil de resistência a tornam um recurso importante para o avanço da pesquisa sobre o câncer de ovário e o desenvolvimento de terapias.
- Tissue
- Ovário
- Disease
- Adenocarcinoma de ovário
- Synonyms
- OVCAR 8
- NIH:OVCAR-8
- OVCAR8
- Ovcar8
- OVCAR.8
- OVCA8
- OVCAR-8/EGFP_LC3
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Doubling time
- 24 a 32 horas
04Identifiers
- Citation
- OVCAR-8 (número de catálogo da Cytion 305383)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1629
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- Mutação: CTNNB1, simples, p.Gln26Arg (c.77A>G), heterozigótica; Mutação: ERBB2, simples, p.Gly776Val (c.2327G>T), heterozigótica; Mutação: KRAS, simples, p.Pro121His (c.362C>A), heterozigótica; Mutação: TP53, simples, c.376-1G>A (p.Tyr126_Lys132del, c.376_396del21), homozigótica, mutação no aceitador de splicing
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contendo 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Seeding density
- 3-4 × 10⁴ células/mL
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 64 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes