الانتقال إلى المحتوى
ETK-1
الأنسجة
النقيلي
المرض
سرطان القنوات الصفراوية
موقع الانتشار
الاستسقاء
المرادفات
ETK1

المستندات

ETK-1

Cell line · رقم المنتج 305529

ETK-1 is a human intrahepatic cholangiocarcinoma (IHCCA) cell line originally established from the ascitic fluid of an adult patient with sarcomatoid chol...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

ETK-1 هو خط خلوي لسرطان القنوات الصفراوية داخل الكبد البشري (IHCCA)، تم إنشاؤه في الأصل من السائل الاستسقائي لمريض بالغ مصاب بسرطان القنوات الصفراوية الساركوماتويدي. أظهر الورم الذي استُخلص منه ETK-1 مكونات كل من السرطان الغدي الأنبوبي والمكونات الساركوماتويدية، ويعكس خط الخلايا النمط الظاهري الساركوماتويد. تنمو خلايا ETK-1 بشكل ملتصق كطبقة أحادية ظهارية موحدة ذات مظهر يشبه الحصى، وتتألف بشكل أساسي من خلايا صغيرة متعددة الأضلاع ذات نوى مستديرة إلى بيضاوية ونويات بارزة. أظهرت الخلايا في المراحل المبكرة من التكاثر زمن مضاعفة للسكان يبلغ حوالي 70 ساعة ونمط كروموسومي مفرط الصبغيات مع عدد كروموسومات نموذجي في منتصف السبعينات، وهو ما يتوافق مع عدم الاستقرار الكروموسومي النموذجي للأورام الخبيثة العدوانية في القناة الصفراوية.

من الناحية المناعية، تعبر خلايا ETK-1 عن علامات الظهارة الصفراوية بما في ذلك γ-glutamyl transpeptidase (GGT)، والسيتوكيراتين 18 (CK18)، والسيتوكيراتين 19 (CK19)، مما يؤكد أصلها من خلايا القنوات الصفراوية. وتكون هذه الخلايا سلبية بالنسبة للعلامات المرتبطة بخلايا الكبد مثل ألفا-فيتوبروتين (AFP) والألبومين في الظروف الأساسية. تُعبِّر خلايا ETK-1 عن فيمنتين، مما يعكس خصائصها الساركوماتويدية والنمط الظاهري الميزنخيمي الجزئي، في حين تفتقر إلى التعبير عن المستضد السرطاني الجنيني (CEA) والمستضد الكربوهيدراتي 19-9 (CA19-9). يتوافق ملف تعريف العلامات هذا مع المكون الساركوماتويدي الذي لوحظ في الورم الأولي، ويبرز السمات التي تتوافق مع الخصائص الشبيهة بالانتقال الظهاري-الميزنخيمي.

كما استُخدمت خلايا ETK-1 كنموذج لدراسة المرونة الخلوية وتمايز السلالات في سرطان القنوات الصفراوية. أدى العلاج بمثبط إنزيم ميثيل ترانسفيراز الحمض النووي 5-أزاسيتيدين إلى إحداث تغيرات مورفولوجية ونمطية، مما أدى إلى ظهور سلالة خلوية مشتقة ذات سمات شبيهة بخلايا الكبد، بما في ذلك التعبير عن AFP والألبومين وإنتغرين α1 والثرومبوبويتين، إلى جانب فقدان بعض علامات القنوات الصفراوية. في نماذج الزرع بين الأنواع، تشكل خلايا ETK-1 غير المعالجة أورامًا تتوافق مع سرطان الغدة الأنبوبي الذي يُظهر نمطًا قنويًّا. تُظهر هذه النتائج أن ETK-1 تحتفظ بمرونة التمايز وتُعد نظامًا مختبريًّا قيِّمًا لدراسة التحول من الظهارة الصفراوية إلى خلايا الكبد، والتنظيم اللاجيني، وتباين الأورام في سرطان القنوات الصفراوية داخل الكبد.

الأنسجة
النقيلي
المرض
سرطان القنوات الصفراوية
موقع الانتشار
الاستسقاء
المرادفات
  • ETK1

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
ETK-1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305529)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1206

04التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: p.Arg175His، متماثل الجينات

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاز، 5 دقائق، 37 درجة مئوية
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل + 10% DMSO للحصول على صلاحية كافية بعد ذوبان الجليد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
61 عامًا
الأصل العرقي
ياباني