الانتقال إلى المحتوى
HROC296
الأنسجة
القولون الصاعد، UICC IIA
المرض
سرطان غدي أولي، المرحلة T3N3N0M0R0L0L0V0، التصنيف G2، Lk(n) +0، Σ Lk(n) 35

المستندات

HROC296

Cell line · رقم المنتج 300853

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف
هذا خط خلوي واحد من سلسلة من خطوط الخلايا السرطانية التي أنشأها الدكتور مايكل لينيباخر من عينات استئصال سرطان عنق الرحم الأولية منذ عام 2006.
الأنسجة
القولون الصاعد، UICC IIA
المرض
سرطان غدي أولي، المرحلة T3N3N0M0R0L0L0V0، التصنيف G2، Lk(n) +0، Σ Lk(n) 35

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
زمن المضاعفة
29 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HROC296 (كتالوج سيتيون رقم 300853)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1V02

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
CD326+
الفيروسات
خالية من الفيروسات المسببة للأمراض البشرية SV40، وJC/BK، وفيروس التهاب الكبد الوبائي، وفيروس التهاب الكبد الوبائي، وفيروس نقص المناعة البشرية.

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
إزالة الوسط وشطف الخلايا الملتصقة باستخدام PBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم (3-5 مل من PBS لكل T25، 5-10 مل لقوارير زراعة الخلايا T75). أضف TrypLE Express (1-2 مل لكل T25، و2.5 مل لكل قارورة زراعة خلايا T75)، ويجب تغطية صفيحة الخلية بالكامل. احتضنها عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 10 إلى 15 دقيقة. يُعاد غمر الخلايا بعناية بالوسط (10 مل)، ثم يُعاد غمر الخلايا بعناية بالوسط (10 مل)، ثم يُعاد غمر الخلايا في وسط جديد ويُوزع في قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد. سينتج عن هذا الخط الخلوي تعليق خلية واحدة. يوصى باستخدام قوارير مغلفة بالكولاجين.
كثافة البذر
2 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
كل 3 إلى 5 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
سريع
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
92 سنة
الأصل العرقي
قوقازي