Přejít na obsah
HROC296
Tkáň
Colon ascendens, UICC Iia
Nemoc
Primární adenokarcinom, TNM stadium T3N0M0R0L0V0, grading G2, Lk(n) +0, Σ Lk(n) 35

Dokumenty

HROC296

Cell line · Číslo výrobku 300853

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis
Jedná se o jednu buněčnou linii ze série nádorových buněčných linií, které od roku 2006 vytvořil Dr. Michael Linnebacher z primárních resekátů CRC.
Tkáň
Colon ascendens, UICC Iia
Nemoc
Primární adenokarcinom, TNM stadium T3N0M0R0L0V0, grading G2, Lk(n) +0, Σ Lk(n) 35

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Doba zdvojnásobení
29 hodin

04Identifikátory

Citace
HROC296 (katalogové číslo Cytion 300853)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1V02

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
CD326+
Viry
Neobsahuje lidské patogenní viry SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte médium a opláchněte adherované buňky pomocí PBS bez vápníku a hořčíku (3-5 ml PBS pro baňky T25, 5-10 ml pro baňky T75). Přidejte TrypLE Express (1-2 ml na T25, 2,5 ml na baňku s buněčnou kulturou T75), buněčný list musí být zcela pokryt. Inkubujte při teplotě 37 °C po dobu 10 až 15 minut. Opatrně resuspendujte buňky s médiem (10 ml), odstřeďujte 3 minuty při 300xg, resuspendujte buňky v čerstvém médiu a rozdělte do nových baněk, které obsahují čerstvé médium. Výsledkem této buněčné linie bude suspenze jednotlivých buněk. Doporučuje se používat baňky potažené kolagenem.
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Zotavení po rozmrazení
Rychle
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
92 let
Etnická příslušnost
Kavkazský