Skip to content
HROC296
Tissue
ลำไส้ใหญ่ส่วนต้น, UICC Iia
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา ระยะ TNM T3N0M0R0L0V0 ระดับ G2 Lk(n) +0 Σ Lk(n) 35

Documents

HROC296

Cell line · Product number 300853

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description
นี่คือเซลล์ไลน์หนึ่งจากชุดของเซลล์ไลน์มะเร็งที่ก่อตัวขึ้นโดย PD Dr. Michael Linnebacher จากตัวอย่างการผ่าตัดมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักตั้งแต่ปี 2006
Tissue
ลำไส้ใหญ่ส่วนต้น, UICC Iia
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา ระยะ TNM T3N0M0R0L0V0 ระดับ G2 Lk(n) +0 Σ Lk(n) 35

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Doubling time
29 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HROC296 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300853)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1V02

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ซีดี326พลัส
Viruses
ปราศจากไวรัสที่ก่อโรคในมนุษย์ SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำวัสดุกลางออกและล้างเซลล์ที่ติดอยู่โดยใช้ PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (3-5 มล. PBS สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T25, 5-10 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75) เติม TrypLE Express (1-2 มล. ต่อ T25, 2.5 มล. ต่อขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75) ให้แผ่นเซลล์ถูกปกคลุมอย่างสมบูรณ์บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 ถึง 15 นาที ระวังในการแขวนเซลล์ให้ละลายด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อ (10 มล.) แล้วปั่นเหวี่ยงที่ 300xg เป็นเวลา 3 นาที แขวนเซลล์ให้ละลายในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และแบ่งใส่ขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ไว้แล้ว สายเซลล์นี้จะให้สารแขวนลอยเซลล์เดี่ยว แนะนำให้ใช้ขวดเพาะเลี้ยงที่เคลือบคอลลาเจน
Seeding density
2 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
ทุก 3 ถึง 5 วัน
Post-thaw recovery
รวดเร็ว
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
92 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน