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HROC296
ティッシュ
上行結腸、UICC Iia
病気
原発性腺癌、TNMステージT3N0M0R0L0V0、悪性度G2、Lk(n)+0、Σ Lk(n)35

HROC296

Cell line · 製品番号 300853

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00税・送料別
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1

01概要

説明
この細胞株は、2006年以来、ミヒャエル・リンネバッハーPD博士がプライマリーCRC切除標本から樹立した一連の腫瘍細胞株のひとつである。
ティッシュ
上行結腸、UICC Iia
病気
原発性腺癌、TNMステージT3N0M0R0L0V0、悪性度G2、Lk(n)+0、Σ Lk(n)35

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
倍増時間
29時間

04識別子

引用
HROC296 (Cytion カタログ番号 300853)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1V02

05発現と感受性

抗原発現
CD326+
ウイルス
ヒト病原性ウイルスSV40、JC/BK、HBV、HCV、HIVを含まない。

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
培地を除去し、カルシウムとマグネシウムを除いたPBSで接着細胞をすすぐ(T25細胞培養フラスコでは3~5mlのPBS、T75細胞培養フラスコでは5~10mlのPBS)。TrypLE Express(T25フラスコ1本につき1~2ml、T75フラスコ1本につき2.5ml)を加え、細胞シートが完全に覆われるようにする。37℃で10~15分間インキュベートする。細胞を慎重に培地(10ml)で再懸濁し、300xgで3分間遠心し、細胞を新鮮な培地に再懸濁し、新鮮な培地を入れた新しいフラスコに分注する。この細胞株は単一細胞懸濁液となる。コラーゲンコートフラスコの使用を推奨する。
播種密度
2 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
3~5日ごと
解凍後の回復
速い
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
92年
民族
白人