ETK-1

ETK-1 е клетъчна линия на човешки интрахепатален холангиокарцином (IHCCA), първоначално изолирана от асцитна течност на възрастен пациент със саркоматоиден холангиокарцином. Туморът, от който е получена ETK-1, е проявявал както тубулен аденокарцином, така и саркоматоидни компоненти, а клетъчната линия отразява саркоматоидния фенотип. Клетките ETK-1 растат адхезивно като еднороден епителиален монослой с вид на калдъръм, съставен главно от малки полигонални клетки с кръгли до овални ядра и изразени ядърца. Клетките в ранните пасажи демонстрираха време за удвояване на популацията от приблизително 70 часа и хипердиплоиден кариотип с модален брой хромозоми в средата на 70-те, което съответства на хромозомната нестабилност, типична за агресивните злокачествени новообразувания на жлъчните пътища.

От имунофенотипна гледна точка клетките ETK-1 експресират маркери на жлъчния епител, включително γ-глутамилтранспептидаза (GGT), цитокератин 18 (CK18) и цитокератин 19 (CK19), което потвърждава техния холангиоцитен произход. При базови условия те са отрицателни за маркери, свързани с хепатоцитите, като алфа-фетопротеин (AFP) и албумин. Клетките ETK-1 експресират виментин, което отразява техните саркоматоидни характеристики и частичния мезенхимен фенотип, докато липсва експресия на карциноембрионален антиген (CEA) и въглехидратен антиген 19-9 (CA19-9). Този профил на маркерите съответства на саркоматоидния компонент, наблюдаван в първичния тумор, и подчертава характеристики, съответстващи на свойства, подобни на епителиално-мезенхимния преход.

ETK-1 е бил използван и като модел за изучаване на клетъчната пластичност и диференциацията на клетъчните линии при холангиокарцином. Лечението с инхибитора на ДНК-метилтрансферазата 5-азацитидин предизвика морфологични и фенотипни промени, което доведе до получаването на производна клетъчна линия с характеристики, подобни на тези на хепатоцитите, включително експресия на AFP, албумин, интегрин α1 и тромбопоетин, както и загуба на определени жлъчни маркери. В модели с ксенографти нелекуваните ETK-1 клетки образуват тумори, съответстващи на тубуларен аденокарцином, проявяващ дуктален фенотип. Тези резултати показват, че ETK-1 запазва пластичността на диференциацията и служи като ценна in vitro система за изследване на трансдиференциацията от жлъчен епител към хепатоцити, епигенетичната регулация и туморната хетерогенност при интрахепаталния холангиокарцином.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация