Премини към съдържанието
HROBMC01
Тъкан
Колоректален
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Мозък

Документи

HROBMC01

Cell line · Номер на продукта 300800

This is one of a series of colorectal carcinoma cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. This line was established fr...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание
Това е една от сериите клетъчни линии на колоректален карцином, създадени от д-р Майкъл Линебахер от 2006 г. насам. Тази линия е създадена от мозъчна метастаза на първичен колоректален карцином.
Тъкан
Колоректален
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Мозък
Приложения
Изследвания върху мозъчните метастази при колоректален рак; биология на метастазите от колоректален рак към мозъка; моделиране на PTEN-негативен колоректален рак; тестове за лекарствена чувствителност; биология на метастатичния колоректален рак, специфичен за мозъка; проучвания с биобанки, съобразени с пациенти с HROC; механизми на метастазиране в централната нервна система

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC brain metastasis cell line established by PD Dr. Linnebacher
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителиален
Статус на MSI
MSS
Време за удвояване
30 часа

04Идентификатори

Източник
HROBMC01 (каталожен номер 300800 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1D08

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
PTEN-
Мутационен профил
P53 mut, APC mut, K-RasG12VA, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
На всеки 3 до 5 дни
Възстановяване след размразяване
След размразяване, разположете клетките на 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за поне 48 часа.
Размразяване и култивиране

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
60 години
Етническа принадлежност
Кавказки