Перейти до вмісту
HROBMC01
Тканина
Колоректальний
Хвороба
Аденокарцинома
Місце метастазування
Мозок

Документи

HROBMC01

Cell line · Номер товару 300800

This is one of a series of colorectal carcinoma cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. This line was established fr...

€800.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис
Це одна з серії клітинних ліній колоректальної карциноми, які були створені доктором Міхаелем Ліннебахером з 2006 року. Ця лінія була отримана з метастазу первинної колоректальної карциноми в головному мозку.
Тканина
Колоректальний
Хвороба
Аденокарцинома
Місце метастазування
Мозок
Застосування
Дослідження метастазування колоректального раку в мозок; біологія метастазування колоректального раку в мозок; моделювання PTEN-негативного колоректального раку; тестування чутливості до ліків; біологія метастатичного колоректального раку, що уражає саме мозок; дослідження на основі біобанку з використанням зразків, підібраних за принципом HROC; механізми метастазування в центральну нервову систему

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
Без ГМО
Детальна інформація щодо статусу ГМО
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC brain metastasis cell line established by PD Dr. Linnebacher
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальний
Статус MSI
MSS
Час подвоєння
30 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HROBMC01 (номер за каталогом Cytion 300800)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1D08

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
PTEN-
Профіль мутацій
P53 мут, APC мут, K-RasG12VA, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 3
Щільність висіву
1 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
Кожні 3-5 днів
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 48 годин.
Розморожування та культивування

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
60 років
Етнічна приналежність
Кавказець