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Capan-2-Zellen
Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
CaPan-2, CAPAN-2, Capan 2, CAPAN 2, Capan2, CAPAN2

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Capan-2-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300144

Die Capan-2-Zelllinie ist eine menschliche Pankreasadenokarzinom-Zelllinie, die ursprünglich aus dem Pankreastumorgewebe eines 56-jährigen kaukasischen Mannes isoliert wurde. Sie w...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie Capan-2 ist eine humane Adenokarzinom-Zelllinie der Bauchspeicheldrüse, die erstmals aus dem Pankreastumorgewebe eines 56-jährigen kaukasischen Mannes isoliert wurde. Sie wurde aus dem Metastasenherd in der Leber gewonnen, was darauf hindeutet, dass sie von einem sekundären Tumor stammt, was sie für die Erforschung von Metastasenprozessen und der Biologie des Pankreaskarzinoms besonders wertvoll macht. Die Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf und wurden ausgiebig zur Untersuchung von Bauchspeicheldrüsenkrebs, Arzneimittelresistenz und Tumorbiologie eingesetzt.

Es ist bekannt, dass Capan-2-Zellen eine mutierte Form des Kirsten Rat Sarcoma Virus Oncogene Homologs (KRAS) exprimieren, eine häufige Mutation bei Bauchspeicheldrüsenkrebs, was sie zu einem robusten Modell für die Untersuchung der KRAS-gesteuerten Tumorgenese macht. Darüber hinaus sind sie durch die Expression von Mutationen des Tumorsuppressorgens p53 gekennzeichnet und weisen chromosomale Instabilitäten auf, die für das Fortschreiten des Krebses und das Ansprechen auf die Behandlung von entscheidender Bedeutung sind. Diese Zelllinie wurde in zahlreichen Studien verwendet, u. a. zur Bewertung der Wirksamkeit von Chemotherapeutika, zur Erforschung der molekularen Mechanismen des Krebsfortschritts und zur Entwicklung gezielter Therapiestrategien.

Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
  • CaPan-2
  • CAPAN-2
  • Capan 2
  • CAPAN 2
  • Capan2
  • CAPAN2

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Polygonal
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen. Bildet ein gut differenziertes Adenokarzinom, das mit einem Pankreaskarzinom vergleichbar ist
Ploidie-Status
Aneuploid
Verdopplungszeit
45 bis 60 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
Capan-2 (Cytion Katalognummer 300144)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0026

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
P53 negativ
Antigenexpression
Blutgruppe B, Rh+
Isoenzyme
Me-2, 2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0004
Mutationsprofil
Capan-2-Zellen tragen eine heterozygote Kras-Mutation in Codon12: GGT>GTT
Produkte
Mucin (Apomucin, MUC-1, MUC-2)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucose, w: stabiles Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² führen innerhalb von 7 Tagen zu einer konfluenten Monoschicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
56 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch