ウィルムス2

Wilms2細胞株は、生殖細胞系列のWT1突然変異を有する小児患者の原発性Wilms腫瘍に由来する。この細胞株は、WT1遺伝子のホモ接合性ナンセンス変異（c.1084 C>T、p.R362X）によって特徴付けられ、その結果、切断された非機能性WT1タンパク質が産生される。腎臓の発生に必須な遺伝子であるWT1の機能喪失は、ウィルムス腫瘍のある種のサブタイプ、特に間葉系または間質系分化に関連した腫瘍の特徴である。Wilms2細胞株は、特に他の重要な遺伝的特徴を保持しているWilms腫瘍との関連において、WT1欠損によって引き起こされる腫瘍形成過程を研究するための重要なモデルである。

ウィルムス2細胞は、Wntシグナル伝達経路の重要な構成要素であるβ-カテニンをコードするCTNNB1遺伝子にも変異を持っている。これらの変異は、特にセリン45に影響を及ぼし、β-カテニンの安定化と蓄積を引き起こし、Wnt経路の恒常的な活性化をもたらす。この活性化はウィルムス腫瘍における細胞増殖と腫瘍形成の原動力であることが知られており、WT1変異を持つ腫瘍の発生と進行に異常なWntシグナル伝達がどのように寄与しているかを理解する上で、ウィルムス2は貴重なモデルとなる。

表現型に関しては、ウィルムス2細胞は間葉様形態を示し、ビメンチンを発現し、サイトケラチンのような上皮性マーカーを欠く。このことは、腫瘍の間質の特徴と一致しており、腎臓の発生における間葉系-上皮系の移行を制御するWT1の役割を強調している。Wilms2のプロテオーム解析により、腫瘍細胞の生存と増殖をサポートすることが知られているPDGFRβやAXLを含むいくつかの受容体チロシンキナーゼ（RTK）の活性化が同定された。さらに、MAPKやPI3K/AKTなどの下流経路も活性化され、Wilms2細胞の悪性化にさらに寄与している。

全体として、Wilms2細胞株は、WT1欠損と異常なWntシグナル伝達によって引き起こされるWilms腫瘍の分子機構を探求するのに不可欠なツールである。その遺伝的および表現型の特徴は、潜在的な治療標的を研究し、間葉系成分を有するウィルムス腫瘍の病態における重要なシグナル伝達経路の役割を理解するための強固なプラットフォームとなる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。