Wilms2

Wilms2 ląstelių linija buvo išvesta iš pirminio Wilms naviko, kuris buvo diagnozuotas vaikui, sergančiam WT1 mutacija. Šiai ląstelių linijai būdinga homozigotinė nonsenso mutacija WT1 gene (c.1084 C>T, p.R362X), dėl kurios susidaro sutrumpintas, nefunkcionalus WT1 baltymas. Funkcinio WT1, geno, būtino inkstų vystymuisi, praradimas yra tam tikrų Vilmso naviko potipių, ypač susijusių su mezenchimine ar stromos diferenciacija, požymis. Wilms2 ląstelių linija yra svarbus modelis tiriant navikinius procesus, kuriuos lemia WT1 praradimas, ypač atsižvelgiant į Wilmso navikus, kurie išlaiko kitus svarbius genetinius požymius.

Wilms2 ląstelėse taip pat yra CTNNB1 geno, kuris koduoja β-kateniną, pagrindinę Wnt signalų kelio sudedamąją dalį, mutacijų. Dėl šių mutacijų, ypač paveikiančių 45-ąjį seriną, β-kateninas stabilizuojasi ir kaupiasi, todėl konstituciškai suaktyvėja Wnt kelias. Šis suaktyvėjimas yra žinomas Vilmso naviko ląstelių proliferacijos ir navikinės genezės veiksnys, todėl Wilms2 yra vertingas modelis, leidžiantis suprasti, kaip aberantinis Wnt signalas prisideda prie WT1 mutacijų navikų vystymosi ir progresavimo.

Pagal fenotipą Wilms2 ląstelės pasižymi į mezenchimines panašiomis savybėmis, jose aptinkamas vimentinas ir nėra epitelio žymenų, tokių kaip citokeratinas. Tai atitinka naviko stromos savybes ir pabrėžia WT1 vaidmenį reguliuojant mezenchiminius-epitelinius pokyčius inkstų vystymosi metu. Atlikus Wilms2 proteominę analizę, nustatyta, kad aktyvuotos kelios receptorių tirozino kinazės (RTK), įskaitant PDGFRβ ir AXL, kurios, kaip žinoma, palaiko naviko ląstelių išlikimą ir dauginimąsi. Be to, suaktyvėja ir tolesnės grandys, tokios kaip MAPK ir PI3K/AKT, o tai dar labiau prisideda prie Wilms2 ląstelių piktybinių savybių.

Apskritai Wilms2 ląstelių linija yra labai svarbi priemonė tiriant Wilms naviko, kurį lemia WT1 praradimas ir pakitęs Wnt signalas, molekulinius mechanizmus. Jos genetinės ir fenotipinės savybės yra patikima platforma, leidžianti tirti galimus terapinius taikinius ir suprasti pagrindinių signalinių kelių vaidmenį Vilmso navikų su mezenchiminiu komponentu patologijoje.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime