Wilms10M

Wilms10M ląstelių linija buvo sukurta iš paciento, sergančio Wilmso naviku (nefroblastoma), metastazavusio plaučių mazgelio. Kaip ir pirminio naviko Wilms10T, Wilms10M ląstelių linija pasižymi homozigotine WT1 geno delecija, dėl kurios visiškai nėra WT1 baltymo. WT1 yra būtinas normaliam inkstų vystymuisi, o jo ištrynimas susijęs su agresyvesniu naviko elgesiu, ypač metastazių atveju. Be to, Wilms10M ląstelės pasižymi heterozigotiškumo praradimu (LOH) 11p15 chromosomos srityje, kurioje yra IGF2 genas, o tai dar labiau prisideda prie šių ląstelių piktybinių savybių.

Wilms10M ląstelės išlaiko stabilų kariotipą be didesnių chromosomų pertvarkymų, išskyrus specifinį WT1 srities išbraukimą. Ši ląstelių linija, gauta iš metastazavusio audinio, yra ypač vertinga tiriant molekulinius mechanizmus, lemiančius Vilmso naviko metastazavimą. Ląstelėms būdingos mezenchiminės savybės, jos išreiškia tokius žymenis kaip vimentinas, tačiau neturi epitelinių žymenų, pavyzdžiui, citokeratino, o tai rodo, kad jos yra kilusios iš naviko stromos komponento.

Atliekant Vilmso10M tyrimus daugiausia dėmesio skiriama signaliniams keliams, kurie yra aktyvūs šiose metastazinėse ląstelėse. Proteominės analizės parodė, kad aktyvuotos kelios receptorių tirozino kinazės (RTK), įskaitant IGF1R, PDGFRβ ir AXL, kurios dalyvauja skatinant ląstelių išgyvenamumą, proliferaciją ir metastazinį potencialą. Taip pat suaktyvėja tolesni MAPK ir PI3K/AKT signaliniai keliai, atliekantys pagrindinį vaidmenį palaikant invazinį ir metastazinį Wilms10M ląstelių fenotipą. Atsižvelgiant į metastazinę Wilms10M kilmę, tai yra labai svarbus modelis, padedantis suprasti molekulinius įvykius, lemiančius Wilms naviko metastazavimą, ir kurti tikslines metastazinės ligos gydymo strategijas.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime