Wilms10M

تم إنشاء سلالة خلايا ويلمز10إم من عقيدات رئوية نقيلية لمريض مصاب بورم ويلمز (ورم أرومي كلوي). ويتميز خط خلايا ويلمز10M، مثل نظيره الورمي الأولي، ويلمز10T، بحذف متماثل الزيجوت لجين WT1، مما يؤدي إلى غياب كامل لبروتين WT1. يعتبر WT1 ضرورياً لنمو الكلى الطبيعي، ويرتبط حذفه بسلوك ورمي أكثر عدوانية، خاصةً في حالات النقائل. وبالإضافة إلى ذلك، تُظهر خلايا ويلمز10إم فقدان التغاير في المنطقة الصبغية 11p15، والتي تتضمن جين IGF2، مما يساهم في زيادة الخصائص الخبيثة لهذه الخلايا.

تحافظ خلايا ويلمز10إم على نمط نووي مستقر مع عدم وجود إعادة ترتيب كروموسومي كبير باستثناء الحذف المحدد لمنطقة WT1. ويُعد هذا الخط الخلوي، المشتق من نسيج نقيلي، ذا قيمة خاصة لدراسة الآليات الجزيئية التي تدفع الورم الخبيث في ورم ويلمز. تُظهر الخلايا خصائص الوسيطة اللُّحمية التي تعبر عن علامات مثل الفيمينتين، بينما تفتقر إلى العلامات الظهارية مثل السيتوكراتين، مما يدل على أصلها من المكون اللحمي للورم.

وقد ركزت الأبحاث التي أُجريت على ورم ويلمز10إم على مسارات الإشارات النشطة في هذه الخلايا النقيلية. وقد أظهرت التحليلات البروتينية تنشيط العديد من مستقبلات التيروزين كيناز (RTKs)، بما في ذلك IGF1R وPDGFRβ وAXL، والتي تشارك في تعزيز بقاء الخلية وتكاثرها وقدرتها على الانتشار. كما يتم تنشيط مسارات إشارات MAPK و PI3K/AKT في اتجاه المصب أيضًا، حيث تلعب دورًا رئيسيًا في الحفاظ على النمط الظاهري الغازي والنقلي لخلايا ويلمز10M. ونظراً لأصله النقيلي، يعتبر ويلمز10إم نموذجاً أساسياً لفهم الأحداث الجزيئية الكامنة وراء ورم ويلمز الخبيث ولتطوير استراتيجيات علاجية مستهدفة ضد المرض النقيلي.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان