Wilms10M

Wilms10M-solulinja perustettiin Wilmsin kasvainta (nefroblastoomaa) sairastavan potilaan metastaattisesta keuhkokyhmystä. Wilms10M-solulinjalle on ominaista, kuten sen primaarikasvaimen vastineelle, Wilms10T:lle, WT1-geenin homotsygoottinen deleetio, joka johtaa WT1-proteiinin täydelliseen puuttumiseen. WT1 on välttämätön munuaisten normaalille kehitykselle, ja sen deletoituminen liittyy aggressiivisempaan kasvainkäyttäytymiseen, erityisesti etäpesäkkeisiin. Lisäksi Wilms10M-soluissa esiintyy heterotsygotian menetystä (LOH) kromosomialueella 11p15, joka sisältää IGF2-geenin, mikä lisää entisestään näiden solujen pahanlaatuisia ominaisuuksia.

Wilms10M-solut säilyttävät vakaan karyotyypin, jossa ei ole merkittäviä kromosomien uudelleenjärjestelyjä lukuun ottamatta WT1-alueen spesifistä deletoitumista. Tämä metastaattisesta kudoksesta peräisin oleva solulinja on erityisen arvokas tutkittaessa molekyylimekanismeja, jotka aiheuttavat metastaasia Wilmsin kasvaimessa. Soluilla on mesenkymaalisia piirteitä, ja ne ilmentävät vimentiinin kaltaisia merkkiaineita, mutta niistä puuttuvat epiteelimerkkiaineet, kuten sytokeratiini, mikä viittaa siihen, että ne ovat peräisin kasvaimen stroomaalisesta komponentista.

Wilms10M-tutkimuksessa on keskitytty signaalireitteihin, jotka ovat aktiivisia näissä metastaattisissa soluissa. Proteomianalyysit ovat osoittaneet useiden reseptorityrosiinikinaasien (RTK), kuten IGF1R:n, PDGFRβ:n ja AXL:n, aktivoituvan, ja ne osallistuvat solujen eloonjäämisen, lisääntymisen ja metastaattisen potentiaalin edistämiseen. Myös MAPK- ja PI3K/AKT-signalointireitit aktivoituvat, ja niillä on keskeinen rooli Wilms10M-solujen invasiivisen ja metastaattisen fenotyypin ylläpitämisessä. Metastaattisen alkuperänsä vuoksi Wilms10M on olennainen malli Wilmsin kasvaimen metastaasin taustalla olevien molekulaaristen tapahtumien ymmärtämiseksi ja metastaattisen taudin kohdennettujen hoitostrategioiden kehittämiseksi.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa