Wilms10M

La lignée cellulaire Wilms10M a été établie à partir d’un nodule pulmonaire métastatique provenant d’un patient atteint d’une tumeur de Wilms (néphroblastome). Tout comme sa contrepartie tumorale primaire, Wilms10T, la lignée cellulaire Wilms10M se caractérise par une délétion homozygote du gène WT1, entraînant l’absence complète de la protéine WT1. Le gène WT1 est essentiel au développement normal du rein, et sa délétion est associée à un comportement tumoral plus agressif, particulièrement dans les cas de métastases. De plus, les cellules Wilms10M présentent une perte d’hétérozygotie (LOH) dans la région chromosomique 11p15, qui comprend le gène IGF2, ce qui contribue davantage aux propriétés malignes de ces cellules.

Les cellules Wilms10M présentent un caryotype stable, sans réarrangements chromosomiques majeurs autres que la délétion spécifique de la région WT1. Cette lignée cellulaire, dérivée d’un tissu métastatique, est particulièrement utile pour l’étude des mécanismes moléculaires à l’origine des métastases dans la tumeur de Wilms. Ces cellules présentent des caractéristiques mésenchymateuses, exprimant des marqueurs tels que la vimentine, tout en étant dépourvues de marqueurs épithéliaux comme la cytokératine, ce qui indique qu’elles proviennent de la composante stromale de la tumeur.

La recherche sur la lignée Wilms10M s’est concentrée sur les voies de signalisation actives dans ces cellules métastatiques. Des analyses protéomiques ont démontré l’activation de plusieurs récepteurs tyrosine-kinases (RTK), notamment l’IGF1R, le PDGFRβ et l’AXL, qui contribuent à favoriser la survie cellulaire, la prolifération et le potentiel métastatique. Les voies de signalisation en aval MAPK et PI3K/AKT sont également activées et jouent un rôle clé dans le maintien du phénotype invasif et métastatique des cellules Wilms10M. Compte tenu de son origine métastatique, le Wilms10M constitue un modèle essentiel pour comprendre les événements moléculaires sous-jacents aux métastases de la tumeur de Wilms et pour élaborer des stratégies thérapeutiques ciblées contre la maladie métastatique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.