Wilms10M

Cellinjen Wilms10M etablerades från en metastaserande lungnodul hos en patient med Wilms tumör (nefroblastom). Liksom sin motsvarighet i primärtumören, Wilms10T, kännetecknas Wilms10M-cellinjen av en homozygot deletion av WT1-genen, vilket resulterar i fullständig avsaknad av WT1-protein. WT1 är avgörande för normal njurutveckling och dess deletion är förknippad med ett mer aggressivt tumörbeteende, särskilt i metastaserande miljöer. Wilms10M-celler uppvisar dessutom förlust av heterozygoti (LOH) i kromosomregion 11p15, som inkluderar IGF2-genen, vilket ytterligare bidrar till dessa cellers maligna egenskaper.

Wilms10M-cellerna har en stabil karyotyp utan några större kromosomala omarrangemang förutom den specifika deletionen av WT1-regionen. Denna cellinje, som härrör från metastaserande vävnad, är särskilt värdefull för att studera de molekylära mekanismer som driver metastasering i Wilms tumör. Cellerna uppvisar mesenkymala egenskaper och uttrycker markörer som vimentin, medan de saknar epitelmarkörer som cytokeratin, vilket tyder på att de härstammar från tumörens stromala komponent.

Forskningen kring Wilms10M har fokuserat på de signalvägar som är aktiva i dessa metastatiska celler. Proteomiska analyser har påvisat aktivering av flera receptortyrosinkinaser (RTK), inklusive IGF1R, PDGFRβ och AXL, som är involverade i att främja cellöverlevnad, proliferation och metastatisk potential. De nedströms MAPK- och PI3K/AKT-signalvägarna aktiveras också, vilket spelar en nyckelroll för att upprätthålla Wilms10M-cellernas invasiva och metastatiska fenotyp. Med tanke på dess metastatiska ursprung är Wilms10M en viktig modell för att förstå de molekylära händelser som ligger till grund för metastasering av Wilms-tumörer och för att utveckla riktade terapeutiska strategier mot metastaserande sjukdomar.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring