Wilms1

Wilms1-cellinjen härrör från ett primärt Wilms-tumörprov från en patient med stora bilaterala njurtumörer, vilket tyder på Wilms-tumör, ett pediatriskt nefroblastom. Denna cellinje har en homozygot nonsensmutation i WT1-genen (c.149 C>A, p.S50X), vilket resulterar i ett trunkerat och icke-funktionellt WT1-protein. WT1-genen, som är kritisk för njurarnas utveckling och funktion, är ofta muterad i Wilms tumörer, särskilt i dem med en stromal subtyp som uppvisar ektopisk mesenkymal differentiering. Wilms1-celler utgör därför en unik in vitro-modell för att studera konsekvenserna av WT1-förlust av funktion i tumörbiologi.

Wilms1-cellinjen har en stabil karyotyp utan några betydande kromosomavvikelser, vilket möjliggör tillförlitlig långtidsodling. Dessa celler uppvisar en mesenkymal fenotyp, som kännetecknas av uttryck av vimentin och frånvaro av epitelmarkörer som cytokeratin, vilket överensstämmer med deras stromala ursprung. Dessutom uppvisar cellinjen en begränsad men anmärkningsvärd mesenkymal differentieringskapacitet, inklusive förmågan att differentieras till muskelliknande celler under lämpliga förhållanden. Detta gör Wilms1 till ett ovärderligt verktyg för att undersöka de molekylära mekanismerna för mesenkymal differentiering och dess deregulering i Wilms tumörpatogenes.

Wilms1 har också använts för att studera aktiveringsstatusen hos viktiga signalvägar som är involverade i tumörutvecklingen. Proteomiska analyser har visat att Wilms1-celler uppvisar fosforylering och aktivering av flera receptortyrosinkinaser, inklusive EGFR och PDGFRβ, samt MAPK-signalvägar nedströms. Dessa fynd belyser relevansen av Wilms1-cellinjen för att utforska riktade terapeutiska metoder för Wilms-tumörer genom att dissekera dessa signalvägars roll i cancercellers överlevnad, proliferation och differentiering.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring