Wilms1

Linia komórkowa Wilms1 została uzyskana z pierwotnej próbki guza Wilmsa uzyskanej od pacjenta z dużymi obustronnymi guzami nerek, wskazującymi na guz Wilmsa, nefroblastomę dziecięcą. Ta linia komórkowa jest nosicielem homozygotycznej mutacji nonsensownej w genie WT1 (c.149 C>A, p.S50X), która skutkuje skróconym i niefunkcjonalnym białkiem WT1. Gen WT1, krytyczny dla rozwoju i funkcji nerek, jest często mutowany w guzach Wilmsa, szczególnie w tych z podtypem zrębu, który wykazuje ektopowe różnicowanie mezenchymalne. Komórki Wilms1 stanowią zatem unikalny model in vitro do badania konsekwencji utraty funkcji WT1 w biologii nowotworów.

Linia komórkowa Wilms1 utrzymuje stabilny kariotyp bez znaczących nieprawidłowości chromosomalnych, co pozwala na niezawodną długoterminową hodowlę. Komórki te wykazują fenotyp mezenchymalny, charakteryzujący się ekspresją wimentyny i brakiem markerów nabłonkowych, takich jak cytokeratyna, co jest zgodne z ich zrębowym pochodzeniem. Dodatkowo, linia komórkowa wykazuje ograniczoną, ale znaczącą zdolność różnicowania mezenchymalnego, w tym zdolność do różnicowania się w komórki mięśniopodobne w odpowiednich warunkach. To sprawia, że Wilms1 jest nieocenionym narzędziem do badania molekularnych mechanizmów różnicowania mezenchymalnego i jego deregulacji w patogenezie guza Wilmsa.

Wilms1 został również wykorzystany do badania stanu aktywacji kluczowych szlaków sygnałowych zaangażowanych w progresję nowotworu. Analizy proteomiczne wykazały, że komórki Wilms1 wykazują fosforylację i aktywację kilku receptorowych kinaz tyrozynowych, w tym EGFR i PDGFRβ, a także dalszych szlaków sygnałowych MAPK. Odkrycia te podkreślają znaczenie linii komórkowej Wilms1 w badaniu ukierunkowanych podejść terapeutycznych do guza Wilmsa poprzez analizę roli tych szlaków w przeżyciu, proliferacji i różnicowaniu komórek nowotworowych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym