ويلمز1

تم اشتقاق خط خلايا ويلمز1 من عينة ورم ويلمز الأولي المأخوذة من مريض يعاني من أورام كبيرة في الكلى ثنائية الجانب، مما يدل على ورم ويلمز وهو ورم أرومي كلوي لدى الأطفال. يحتوي هذا الخط الخلوي على طفرة متماثلة الزيجوت في جين WT1 (ج.149 C>A، p.S50X)، مما يؤدي إلى بروتين WT1 مبتور وغير فعال. وكثيراً ما يحدث تحور في جين WT1، وهو الجين الحيوي لنمو الكلى ووظيفتها، في ورم ويلمز، خاصةً في تلك التي لديها نوع فرعي لحمي يُظهر تمايزاً خارجياً في اللُّحمة المتوسطة. وبالتالي، تمثل خلايا ويلمز1 نموذجًا فريدًا في المختبر لدراسة عواقب فقدان WT1 لوظيفته في بيولوجيا الورم.

يحافظ خط خلايا ويلمز1 على نمط نووي مستقر مع عدم وجود تشوهات كروموسومية كبيرة، مما يسمح بزراعة موثوقة على المدى الطويل. تُظهر هذه الخلايا نمطاً ظاهرياً متوسّطاً يتميز بالتعبير عن الفيمينتين وغياب العلامات الظهارية مثل السيتوكراتين، بما يتوافق مع أصلها اللحمي. بالإضافة إلى ذلك، يُظهر هذا الخط الخلوي قدرة محدودة ولكن ملحوظة على التمايز الوسيمي الوسيطي بما في ذلك القدرة على التمايز إلى خلايا شبيهة بالعضلات في ظل الظروف المناسبة. وهذا ما يجعل من ويلمز1 أداة لا تقدر بثمن لدراسة الآليات الجزيئية للتمايز الوسيمي الوسيطي وتغييره في التسبب في الإصابة بأورام ويلمز.

كما تم استخدام ويلمز1 لدراسة حالة تنشيط مسارات الإشارات الرئيسية المشاركة في تطور الورم. وقد أظهرت التحليلات البروتينية أن خلايا ويلمز1 تُظهر فسفرة وتفعيل العديد من مستقبلات التيروزين كيناز، بما في ذلك EGFR و PDGFRβ، بالإضافة إلى مسارات إشارات MAPK في اتجاه المصب. وتسلط هذه النتائج الضوء على أهمية خط خلايا ويلمز1 في استكشاف الأساليب العلاجية المستهدفة لورم ويلمز من خلال تشريح دور هذه المسارات في بقاء الخلايا السرطانية وتكاثرها وتمايزها.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان