Wilms1

Wilms1-cellelinjen stammer fra en primær Wilms-tumorprøve fra en patient med store bilaterale nyretumorer, der tyder på Wilms-tumor, et pædiatrisk nefroblastom. Denne cellelinje har en homozygot nonsensmutation i WT1-genet (c.149 C>A, p.S50X), som resulterer i et afkortet og ikke-funktionelt WT1-protein. WT1-genet, der er afgørende for nyrernes udvikling og funktion, er ofte muteret i Wilms-tumorer, især i dem med en stromal subtype, der udviser ektopisk mesenkymal differentiering. Wilms1-celler repræsenterer derfor en unik in vitro-model til undersøgelse af konsekvenserne af tab af WT1-funktion i tumorbiologi.

Wilms1-cellelinjen opretholder en stabil karyotype uden væsentlige kromosomale abnormiteter, hvilket giver mulighed for pålidelig langtidskultur. Disse celler udviser en mesenkymal fænotype, der er karakteriseret ved ekspression af vimentin og fravær af epitelmarkører som cytokeratin, hvilket er i overensstemmelse med deres stromale oprindelse. Derudover viser cellelinjen en begrænset, men bemærkelsesværdig mesenkymal differentieringskapacitet, herunder evnen til at differentiere sig til muskellignende celler under passende forhold. Det gør Wilms1 til et uvurderligt værktøj til at undersøge de molekylære mekanismer for mesenkymal differentiering og dens deregulering i Wilms-tumorens patogenese.

Wilms1 er også blevet brugt til at undersøge aktiveringsstatus for vigtige signalveje, der er involveret i tumorprogression. Proteomiske analyser har vist, at Wilms1-celler udviser fosforylering og aktivering af flere receptortyrosinkinaser, herunder EGFR og PDGFRβ, samt downstream MAPK-signalveje. Disse resultater fremhæver relevansen af Wilms1-cellelinjen i udforskningen af målrettede terapeutiske tilgange til Wilms-tumor ved at dissekere disse vejes rolle i kræftcellers overlevelse, spredning og differentiering.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring