Wilms1

Garis sel Wilms1 berasal dari sampel tumor Wilms primer yang diperoleh dari pasien yang datang dengan tumor ginjal bilateral besar, yang mengindikasikan tumor Wilms, nefroblastoma pediatrik. Garis sel ini memiliki mutasi omong kosong homozigot pada gen WT1 (c.149 C>A, p.S50X), yang menghasilkan protein WT1 yang terpotong dan tidak berfungsi. Gen WT1, yang sangat penting untuk perkembangan dan fungsi ginjal, sering mengalami mutasi pada tumor Wilms, terutama pada tumor dengan subtipe stroma yang menunjukkan diferensiasi mesenkim ektopik. Oleh karena itu, sel Wilms1 mewakili model in vitro yang unik untuk mempelajari konsekuensi hilangnya fungsi WT1 dalam biologi tumor.

Garis sel Wilms1 mempertahankan kariotipe yang stabil tanpa kelainan kromosom yang signifikan, memungkinkan kultur jangka panjang yang andal. Sel-sel ini menunjukkan fenotipe mesenkim, yang ditandai dengan ekspresi vimentin dan tidak adanya penanda epitel seperti sitokeratin, konsisten dengan asal stroma mereka. Selain itu, garis sel menunjukkan kapasitas diferensiasi mesenkim yang terbatas tetapi penting, termasuk kemampuan untuk berdiferensiasi menjadi sel seperti otot dalam kondisi yang sesuai. Hal ini membuat Wilms1 menjadi alat yang sangat berharga untuk menyelidiki mekanisme molekuler diferensiasi mesenkim dan deregulasinya dalam patogenesis tumor Wilms.

Wilms1 juga telah digunakan untuk mempelajari status aktivasi jalur pensinyalan utama yang terlibat dalam perkembangan tumor. Analisis proteomik telah menunjukkan bahwa sel Wilms1 menunjukkan fosforilasi dan aktivasi beberapa reseptor tirosin kinase, termasuk EGFR dan PDGFRβ, serta jalur pensinyalan MAPK hilir. Temuan ini menyoroti relevansi garis sel Wilms1 dalam mengeksplorasi pendekatan terapeutik yang ditargetkan untuk tumor Wilms dengan membedah peran jalur ini dalam kelangsungan hidup, proliferasi, dan diferensiasi sel kanker.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami