Wilms11

Garis sel Wilms11 berasal dari tumor Wilms primer (nefroblastoma) pada pasien anak. Tidak seperti banyak garis sel tumor Wilms lainnya, Wilms11 ditandai dengan adanya WT1 tipe liar, yang berarti tidak memiliki mutasi pada gen WT1, yang biasanya dikaitkan dengan tumor Wilms yang menunjukkan fenotipe yang lebih agresif atau stroma. Namun, tumor Wilms11 menunjukkan diferensiasi stroma yang signifikan, dengan area diferensiasi rhabdomyomatous yang luas, yang mengindikasikan adanya elemen mesenkim di dalam tumor. Kehadiran WT1 tipe liar, ditambah dengan diferensiasi stroma tumor, memberikan model yang unik untuk memahami biologi tumor Wilms dalam kasus-kasus di mana mutasi WT1 tidak ada.

Studi genetik Wilms11 telah menunjukkan bahwa garis sel ini membawa mutasi spesifik tumor pada CTNNB1, gen yang mengkode β-Catenin, yang memainkan peran penting dalam jalur pensinyalan Wnt. Pada Wilms11, mutasi ini memengaruhi serin 45, situs fosforilasi utama yang terlibat dalam degradasi β-Catenin. Mutasi CTNNB1 menghasilkan stabilisasi β-Catenin, yang mengarah pada akumulasi dan aktivasi konstitutif jalur pensinyalan Wnt, pendorong proliferasi sel dan tumorigenesis. Hal ini membuat Wilms11 menjadi model penting untuk mempelajari interaksi antara pensinyalan Wnt dan perkembangan tumor Wilms, terutama dalam kasus-kasus di mana WT1 tetap utuh.

Analisis proteomik Wilms11 telah mengungkapkan aktivasi beberapa reseptor tirosin kinase (RTK), termasuk PDGFRβ dan AXL, yang terlibat dalam mendorong pertumbuhan dan kelangsungan hidup sel tumor. Jalur pensinyalan hilir, seperti jalur MAPK dan PI3K / AKT, juga diaktifkan dalam sel Wilms11, yang berkontribusi pada perilaku tumorigenik mereka. Kemampuan sel Wilms11 untuk mengalami diferensiasi mesenkim, terutama diferensiasi rhabdomyomatous, menyoroti potensinya sebagai model untuk mempelajari komponen mesenkim tumor Wilms. Secara keseluruhan, Wilms11 berfungsi sebagai alat yang berharga untuk menyelidiki mekanisme molekuler yang mendorong tumorigenesis Wilms tanpa adanya mutasi WT1 tetapi dalam konteks aktivasi jalur Wnt.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami