Wilms11

La linea cellulare Wilms11 è stata derivata da un tumore di Wilms primario (nefroblastoma) di un paziente pediatrico. A differenza di molte altre linee cellulari del tumore di Wilms, Wilms11 è caratterizzata dalla presenza di WT1 wild-type, cioè non ospita mutazioni nel gene WT1, tipicamente associate a tumori di Wilms che presentano fenotipi più aggressivi o stromali. Tuttavia, il tumore Wilms11 presentava una significativa differenziazione stromale, con ampie aree di differenziazione rabdomiomatosa, indicative di elementi mesenchimali all'interno del tumore. La presenza di WT1 wild-type, insieme alla differenziazione stromale del tumore, fornisce un modello unico per comprendere la biologia del tumore di Wilms nei casi in cui le mutazioni di WT1 sono assenti.

Studi genetici su Wilms11 hanno dimostrato che questa linea cellulare porta una mutazione specifica del tumore in CTNNB1, il gene che codifica la β-catenina, che svolge un ruolo cruciale nella via di segnalazione Wnt. In Wilms11, questa mutazione colpisce la serina 45, un sito di fosforilazione chiave coinvolto nella degradazione della β-Catenina. La mutazione CTNNB1 determina la stabilizzazione della β-catenina, con conseguente accumulo e attivazione costitutiva della via di segnalazione Wnt, un motore della proliferazione cellulare e della tumorigenesi. Ciò rende Wilms11 un modello importante per studiare l'interazione tra la segnalazione Wnt e lo sviluppo del tumore di Wilms, in particolare nei casi in cui WT1 rimane intatto.

Le analisi proteomiche di Wilms11 hanno rivelato l'attivazione di diverse tirosin-chinasi recettoriali (RTK), tra cui PDGFRβ e AXL, coinvolte nella crescita e nella sopravvivenza delle cellule tumorali. Anche le vie di segnalazione a valle, come le vie MAPK e PI3K/AKT, sono attivate nelle cellule Wilms11, contribuendo al loro comportamento tumorigenico. La capacità delle cellule Wilms11 di subire una differenziazione mesenchimale, in particolare rabdomiomatosa, ne evidenzia il potenziale come modello per lo studio delle componenti mesenchimali del tumore di Wilms. Nel complesso, Wilms11 è uno strumento prezioso per studiare i meccanismi molecolari che guidano la tumorigenesi di Wilms in assenza di mutazioni WT1 ma nel contesto dell'attivazione della via Wnt.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia