Wilms10T

La linea cellulare Wilms10T è stata derivata da un campione primario di tumore di Wilms ottenuto da un paziente con tumore di Wilms, un nefroblastoma pediatrico. Questa linea cellulare è caratterizzata da una delezione omozigote del gene WT1, che porta alla perdita completa della funzione di WT1, un gene critico coinvolto nello sviluppo del rene e nel mantenimento della normale differenziazione renale. A differenza di molte altre linee cellulari del tumore di Wilms, Wilms10T non esprime alcuna proteina WT1, il che riflette le gravi alterazioni genetiche presenti in questo sottotipo di tumore. Inoltre, la linea cellulare Wilms10T presenta una perdita di eterozigosi (LOH) nella regione cromosomica 11p15, che include geni importanti come IGF2, contribuendo ulteriormente alle sue proprietà tumorigeniche.

Le cellule Wilms10T hanno un cariotipo normale e stabile, senza riarrangiamenti cromosomici importanti, a parte la delezione specifica della regione WT1. Questa linea cellulare è stata ampiamente utilizzata per studiare gli effetti della perdita completa di WT1 sulla biologia tumorale, compreso il suo impatto sulla proliferazione cellulare, sulla differenziazione e sulla risposta a varie vie di segnalazione. Le cellule mantengono caratteristiche mesenchimali, esprimendo marcatori come la vimentina, mentre mancano marcatori epiteliali come la citocheratina, indicativi della loro origine stromale.

Un'importante ricerca si è concentrata sulle vie di segnalazione attive nelle cellule Wilms10T. Studi di proteomica hanno dimostrato che queste cellule mostrano l'attivazione di diverse tirosin-chinasi recettoriali (RTK), come IGF1R, PDGFRβ e AXL, che sono note per guidare la tumorigenesi. Inoltre, le vie di segnalazione a valle, tra cui le vie MAPK e PI3K/AKT, sono attivate nelle cellule Wilms10T, contribuendo al loro fenotipo tumorale aggressivo. La caratterizzazione completa di Wilms10T ne fa un modello prezioso per studiare le basi molecolari del tumore di Wilms con perdita completa di WT1 e per esplorare potenziali bersagli terapeutici in questo sottotipo di tumore aggressivo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia