Wilms10T

Celična linija Wilms10T je bila pridobljena iz primarnega vzorca Wilmsovega tumorja, pridobljenega od bolnika z Wilmsovim tumorjem, pediatričnim nefroblastomom. Za to celično linijo je značilna homozigotna delecija gena WT1, ki povzroči popolno izgubo funkcije WT1, ključnega gena, vključenega v razvoj ledvic in vzdrževanje normalne diferenciacije ledvic. Za razliko od številnih drugih celičnih linij Wilmsovega tumorja Wilms10T ne izraža beljakovin WT1, kar odraža hude genetske spremembe, prisotne v tem podtipu tumorja. Poleg tega ima celična linija Wilms10T izgubo heterozigotnosti (LOH) v kromosomski regiji 11p15, ki vključuje pomembne gene, kot je IGF2, kar še dodatno prispeva k njenim tumorogenim lastnostim.

Celice Wilms10T imajo stabilen normalen kariotip brez večjih kromosomskih preureditev, razen specifične delecije regije WT1. Ta celična linija je bila obsežno uporabljena za preučevanje učinkov popolne izgube WT1 na tumorsko biologijo, vključno z njenim vplivom na proliferacijo, diferenciacijo in odziv na različne signalne poti. Celice ohranjajo mezenhimske značilnosti in izražajo označevalce, kot je vimentin, nimajo pa epitelijskih označevalcev, kot je citokeratin, kar kaže na njihov stromalni izvor.

Pomembne raziskave so se osredotočile na signalne poti, ki delujejo v celicah Wilms10T. Proteomske študije so pokazale, da te celice aktivirajo več receptorskih tirozin kinaz (RTK), kot so IGF1R, PDGFRβ in AXL, za katere je znano, da spodbujajo tumorigenezo. Poleg tega se v celicah Wilms10T aktivirajo signalne poti, vključno s potmi MAPK in PI3K/AKT, kar prispeva k njihovemu agresivnemu tumorskemu fenotipu. Zaradi izčrpne karakteristike je Wilms10T dragocen model za raziskovanje molekularnih osnov tumorja Wilms s popolno izgubo WT1 in za raziskovanje potencialnih terapevtskih ciljev pri tem agresivnem podtipu tumorja.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo