Wilms10T

Wilms10T hücre hattı, pediatrik bir nefroblastom olan Wilms tümörlü bir hastadan elde edilen birincil Wilms tümör örneğinden türetilmiştir. Bu hücre hattı, WT1 geninin homozigot delesyonu ile karakterize edilir ve böbrek gelişimi ve normal böbrek farklılaşmasının sürdürülmesinde rol oynayan kritik bir gen olan WT1 fonksiyonunun tamamen kaybına yol açar. Diğer birçok Wilms tümör hücre dizisinin aksine, Wilms10T'de herhangi bir WT1 protein ekspresyonu yoktur, bu da bu tümör alt tipinde mevcut olan ciddi genetik değişiklikleri yansıtır. Ayrıca, Wilms10T hücre hattı, IGF2 gibi önemli genleri içeren 11p15 kromozomal bölgesinde heterozigotluk kaybı (LOH) sergileyerek tümörijenik özelliklerine daha fazla katkıda bulunur.

Wilms10T hücreleri, WT1 bölgesinin spesifik delesyonu dışında önemli bir kromozomal yeniden düzenleme içermeyen stabil bir normal karyotipe sahiptir. Bu hücre hattı, hücre çoğalması, farklılaşması ve çeşitli sinyal yollarına yanıt üzerindeki etkisi de dahil olmak üzere, tam WT1 kaybının tümör biyolojisi üzerindeki etkilerini incelemek için kapsamlı bir şekilde kullanılmıştır. Hücreler, vimentin gibi belirteçleri ifade ederek mezenkimal özelliklerini korurken, stromal kökenlerinin göstergesi olan sitokeratin gibi epitelyal belirteçlerden yoksundur.

Önemli araştırmalar Wilms10T hücrelerinde aktif olan sinyal yolaklarına odaklanmıştır. Proteomik çalışmalar, bu hücrelerin tümörigenezi yönlendirdiği bilinen IGF1R, PDGFRβ ve AXL gibi çeşitli reseptör tirozin kinazların (RTK'lar) aktivasyonunu gösterdiğini ortaya koymuştur. Ayrıca, MAPK ve PI3K/AKT yolakları da dahil olmak üzere aşağı akış sinyal yolakları Wilms10T hücrelerinde aktive olarak agresif tümör fenotiplerine katkıda bulunur. Wilms10T'nin kapsamlı karakterizasyonu, onu tam WT1 kaybı olan Wilms tümörünün moleküler temellerini araştırmanın yanı sıra bu agresif tümör alt tipindeki potansiyel terapötik hedefleri keşfetmek için değerli bir model haline getirmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın