Wilms11

Wilms11 hücre hattı, pediatrik bir hastadaki birincil Wilms tümöründen (nefroblastom) türetilmiştir. Diğer birçok Wilms tümör hücre hattının aksine, Wilms11 vahşi tip WT1'in varlığı ile karakterize edilir, yani WT1 geninde mutasyonlar barındırmaz, bu da tipik olarak daha agresif veya stromal fenotipler sergileyen Wilms tümörleri ile ilişkilidir. Bununla birlikte, Wilms11 tümörü, tümör içindeki mezenkimal elementlerin göstergesi olan geniş rabdomiyomatöz farklılaşma alanları ile önemli stromal farklılaşma sergilemiştir. Yabani tip WT1'in varlığı, tümörün stromal farklılaşması ile birleştiğinde, WT1 mutasyonlarının bulunmadığı durumlarda Wilms tümör biyolojisini anlamak için benzersiz bir model sağlar.

Wilms11'in genetik çalışmaları, bu hücre hattının Wnt sinyal yolunda çok önemli bir rol oynayan β-Catenin'i kodlayan gen olan CTNNB1'de tümöre özgü bir mutasyon taşıdığını göstermiştir. Wilms11'de bu mutasyon, β-Catenin degradasyonunda rol oynayan önemli bir fosforilasyon bölgesi olan serin 45'i etkiler. CTNNB1 mutasyonu, β-Catenin'in stabilizasyonuna yol açarak birikmesine ve hücre çoğalması ve tümörigenezin itici gücü olan Wnt sinyal yolunun yapısal aktivasyonuna neden olur. Bu durum Wilms11'i, özellikle WT1'in sağlam kaldığı durumlarda, Wnt sinyali ve Wilms tümör gelişimi arasındaki etkileşimi incelemek için önemli bir model haline getirmektedir.

Wilms11'in proteomik analizleri, PDGFRβ ve AXL dahil olmak üzere, tümör hücresi büyümesi ve hayatta kalmasında rol oynayan çeşitli reseptör tirozin kinazların (RTK'lar) aktivasyonunu ortaya çıkarmıştır. MAPK ve PI3K/AKT yolakları gibi aşağı akış sinyal yolakları da Wilms11 hücrelerinde aktive olarak tümörijenik davranışlarına katkıda bulunur. Wilms11 hücrelerinin mezenkimal farklılaşmaya, özellikle de rabdomiyomatöz farklılaşmaya uğrama yeteneği, Wilms tümörünün mezenkimal bileşenlerini incelemek için bir model olarak potansiyellerini vurgulamaktadır. Genel olarak, Wilms11, WT1 mutasyonlarının yokluğunda ancak Wnt yolağı aktivasyonu bağlamında Wilms tümörigenezini yönlendiren moleküler mekanizmaları araştırmak için değerli bir araç olarak hizmet eder.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın