Wilms11

A Wilms11 sejtvonal egy gyermekbeteg primer Wilms-tumorából (nefroblastoma) származik. Sok más Wilms-tumor-sejtvonaltól eltérően a Wilms11-et a vad típusú WT1 jelenléte jellemzi, ami azt jelenti, hogy nem tartalmaz mutációkat a WT1 génben, ami jellemzően az agresszívebb vagy stromális fenotípust mutató Wilms-tumorokhoz társul. A Wilms11 tumor azonban jelentős stromális differenciálódást mutatott, nagy területeken rhabdomyomatos differenciálódást, ami a tumoron belüli mesenchymális elemekre utal. A vad típusú WT1 jelenléte a tumor stromális differenciálódásával párosulva egyedülálló modellt nyújt a Wilms-tumor biológiájának megértéséhez azokban az esetekben, amikor a WT1 mutáció hiányzik.

A Wilms11 genetikai vizsgálatai kimutatták, hogy ez a sejtvonal tumorspecifikus mutációt hordoz a CTNNB1-ben, a β-katenint kódoló génben, amely döntő szerepet játszik a Wnt jelátviteli útvonalban. A Wilms11-ben ez a mutáció a 45-ös szerint érinti, amely a β-katenin degradációjában részt vevő kulcsfontosságú foszforilációs hely. A CTNNB1 mutáció a β-Catenin stabilizációját eredményezi, ami a β-Catenin felhalmozódásához és a Wnt jelátviteli útvonal konstitutív aktiválásához vezet, amely a sejtproliferáció és a tumorigenezis egyik mozgatórugója. Ez teszi a Wilms11-et fontos modellé a Wnt-szignalizáció és a Wilms-tumor kialakulása közötti kölcsönhatás tanulmányozására, különösen azokban az esetekben, amikor a WT1 érintetlen marad.

A Wilms11 proteomikai elemzései számos receptor-tirozin-kináz (RTK), köztük a PDGFRβ és az AXL aktiválódását mutatták ki, amelyek részt vesznek a tumorsejtek növekedésének és túlélésének irányításában. A downstream jelátviteli útvonalak, például a MAPK és a PI3K/AKT útvonalak szintén aktiválódnak a Wilms11 sejtekben, hozzájárulva tumorigén viselkedésükhöz. A Wilms11 sejteknek a mesenchymalis differenciálódásra, különösen a rhabdomyomatos differenciálódásra való képessége kiemeli a Wilms-tumor mesenchymalis komponenseinek tanulmányozására szolgáló modellként való potenciáljukat. Összességében a Wilms11 értékes eszközként szolgál a Wilms-tumorigenezist a WT1 mutációk hiányában, de a Wnt-útvonal aktiválódásának kontextusában irányító molekuláris mechanizmusok vizsgálatára.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban