Wilms2

A Wilms2 sejtvonal egy csíravonalbeli WT1 mutációval rendelkező gyermekbeteg primer Wilms-tumorából származik. Ezt a sejtvonalat a WT1 gén homozigóta nonszensz mutációja jellemzi (c.1084 C>T, p.R362X), amely egy csonka, nem funkcionális WT1 fehérje termelődését eredményezi. A funkcionális WT1, a vese fejlődéséhez nélkülözhetetlen gén elvesztése a Wilms-tumor bizonyos altípusainak jellemzője, különösen a mesenchymális vagy stromális differenciálódással járó típusoké. A Wilms2 sejtvonal jelentős modell a WT1 elvesztése által vezérelt tumorigenikus folyamatok tanulmányozására, különösen az egyéb kritikus genetikai jellemzőket megőrző Wilms-tumorok összefüggésében.

A Wilms2 sejtek mutációkat hordoznak a CTNNB1 génben is, amely a β-katenint, a Wnt jelátviteli útvonal egyik kulcskomponensét kódolja. Ezek a mutációk, amelyek kifejezetten a 45-ös szerint érintik, a β-Catenin stabilizálódásához és felhalmozódásához vezetnek, ami a Wnt-útvonal konstitutív aktiválódását eredményezi. Ez az aktiváció a Wilms-tumorban a sejtproliferáció és a tumorigenezis ismert hajtóereje, így a Wilms2 értékes modell annak megértéséhez, hogy az aberráns Wnt-szignalizáció hogyan járul hozzá a WT1-mutációval rendelkező tumorok kialakulásához és progressziójához.

A fenotípust tekintve a Wilms2 sejtek mesenchymalis morfológiát mutatnak, vimentint expresszálnak, és hiányoznak belőlük az epiteliális markerek, például a citokeratin. Ez összhangban van a tumor stromális jellemzőivel, és aláhúzza a WT1 szerepét a vese fejlődése során a mesenchymalis-epithelialis átmenetek szabályozásában. A Wilms2 proteomikai elemzései számos receptor-tirozin-kináz (RTK), köztük a PDGFRβ és az AXL aktiválódását azonosították, amelyekről ismert, hogy támogatják a tumorsejtek túlélését és proliferációját. Emellett olyan downstream útvonalak is aktiválódnak, mint a MAPK és a PI3K/AKT, ami tovább hozzájárul a Wilms2 sejtek rosszindulatú tulajdonságaihoz.

Összességében a Wilms2 sejtvonal alapvető eszközként szolgál a WT1 elvesztése és az aberráns Wnt-szignalizáció által vezérelt Wilms-tumor molekuláris mechanizmusainak feltárásához. Genetikai és fenotípusos jellemzői robusztus platformot biztosítanak a potenciális terápiás célpontok vizsgálatához és a kulcsfontosságú jelátviteli útvonalak szerepének megértéséhez a mesenchymális komponensű Wilms-tumorok patológiájában.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban