Wilms10T

A Wilms10T sejtvonal egy gyermekkori nefroblastómában, Wilms-tumorban szenvedő betegből nyert primer Wilms-tumor mintából származik. Ezt a sejtvonalat a WT1 gén homozigóta deléciója jellemzi, ami a WT1 funkció teljes elvesztéséhez vezet, amely egy kritikus gén, amely részt vesz a vese fejlődésében és a normális vese differenciálódás fenntartásában. Sok más Wilms-tumor-sejtvonaltól eltérően a Wilms10T-ben nem expresszálódik a WT1 fehérje, ami tükrözi az ebben a tumor altípusban jelen lévő súlyos genetikai elváltozásokat. Ezenkívül a Wilms10T sejtvonal heterozigozitásvesztést (LOH) mutat a 11p15 kromoszómarégióban, amely olyan fontos géneket tartalmaz, mint az IGF2, ami tovább növeli tumorigén tulajdonságait.

A Wilms10T sejtek stabilan normális kariotípussal rendelkeznek, a WT1 régió specifikus delécióján kívül nincsenek jelentősebb kromoszóma-átrendeződések. Ezt a sejtvonalat széles körben használták a WT1 teljes elvesztésének a tumorbiológiára gyakorolt hatásának tanulmányozására, beleértve a sejtek proliferációjára, differenciálódására és a különböző jelátviteli útvonalakra adott válaszra gyakorolt hatását. A sejtek megtartják a mesenchymális jellegzetességeket, olyan markereket expresszálva, mint a vimentin, miközben hiányoznak az epithelialis markerek, mint a citokeratin, ami a stromális eredetükre utal.

Jelentős kutatások összpontosítottak a Wilms10T sejtekben aktív jelátviteli útvonalakra. Proteomikai vizsgálatok kimutatták, hogy ezek a sejtek számos receptor-tirozin-kináz (RTK), például az IGF1R, PDGFRβ és AXL aktiválódását mutatják, amelyekről ismert, hogy a tumorigenezist irányítják. Emellett a Wilms10T sejtekben aktiválódnak a downstream jelátviteli útvonalak, beleértve a MAPK és a PI3K/AKT útvonalakat, ami hozzájárul agresszív tumorfenotípusukhoz. A Wilms10T átfogó jellemzése értékes modellé teszi a teljes WT1-veszteséggel járó Wilms-tumor molekuláris alapjainak vizsgálatához, valamint az ebben az agresszív tumor altípusban lehetséges terápiás célpontok feltárásához.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban