Wilms10T

Linia komórkowa Wilms10T została uzyskana z pierwotnej próbki guza Wilmsa uzyskanej od pacjenta z guzem Wilmsa, nefroblastomą dziecięcą. Ta linia komórkowa charakteryzuje się homozygotyczną delecją genu WT1, co prowadzi do całkowitej utraty funkcji WT1, krytycznego genu zaangażowanego w rozwój nerek i utrzymanie prawidłowego różnicowania nerek. W przeciwieństwie do wielu innych linii komórkowych guza Wilmsa, Wilms10T nie wykazuje ekspresji białka WT1, co odzwierciedla poważne zmiany genetyczne obecne w tym podtypie guza. Dodatkowo, linia komórkowa Wilms10T wykazuje utratę heterozygotyczności (LOH) w regionie chromosomalnym 11p15, który obejmuje ważne geny, takie jak IGF2, co dodatkowo przyczynia się do jej właściwości nowotworowych.

Komórki Wilmsa10T mają stabilny prawidłowy kariotyp bez większych rearanżacji chromosomalnych poza specyficzną delecją regionu WT1. Ta linia komórkowa była szeroko wykorzystywana do badania wpływu całkowitej utraty WT1 na biologię nowotworu, w tym jej wpływu na proliferację komórek, różnicowanie i odpowiedź na różne szlaki sygnałowe. Komórki zachowują cechy mezenchymalne, wyrażając markery takie jak wimentyna, przy jednoczesnym braku markerów nabłonkowych, takich jak cytokeratyna, co wskazuje na ich zrębowe pochodzenie.

Znaczące badania koncentrowały się na szlakach sygnałowych aktywnych w komórkach Wilmsa10T. Badania proteomiczne wykazały, że komórki te wykazują aktywację kilku receptorowych kinaz tyrozynowych (RTK), takich jak IGF1R, PDGFRβ i AXL, o których wiadomo, że napędzają nowotworzenie. Dodatkowo, szlaki sygnałowe, w tym szlaki MAPK i PI3K/AKT, są aktywowane w komórkach Wilms10T, przyczyniając się do ich agresywnego fenotypu nowotworowego. Kompleksowa charakterystyka Wilms10T sprawia, że jest to cenny model do badania molekularnych podstaw guza Wilmsa z całkowitą utratą WT1, a także do badania potencjalnych celów terapeutycznych w tym agresywnym podtypie guza.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym