Wilms10T

Wilms10T šūnu līnija tika iegūta no primārā Vilmsa audzēja parauga, kas iegūts no pacienta ar Vilmsa audzēju - bērnu nefroblastomu. Šai šūnu līnijai ir raksturīga homozigotiska WT1 gēna delecija, kā rezultātā pilnībā tiek zaudēta WT1 funkcija, kas ir ļoti svarīgs gēns, kurš ir iesaistīts nieru attīstībā un normālas nieru diferenciācijas uzturēšanā. Atšķirībā no daudzām citām Vilmsa audzēja šūnu līnijām Wilms10T nav WT1 proteīna ekspresijas, kas atspoguļo nopietnās ģenētiskās izmaiņas šajā audzēja apakštipā. Turklāt Wilms10T šūnu līnijai piemīt heterozigotozitātes zudums (LOH) 11p15 hromosomu apgabalā, kas ietver tādus svarīgus gēnus kā IGF2, kas vēl vairāk pastiprina tās audzēja īpašības.

Wilms10T šūnām ir stabils normāls kariotips bez būtiskām hromosomu pārkārtojumiem, izņemot specifisku WT1 reģiona izdzēšanu. Šī šūnu līnija ir plaši izmantota, lai pētītu pilnīgu WT1 zuduma ietekmi uz audzēju bioloģiju, tostarp tā ietekmi uz šūnu proliferāciju, diferenciāciju un reakciju uz dažādiem signālu ceļiem. Šīm šūnām saglabājas mezenhimālas īpašības, tās ekspresē tādus marķierus kā vimentīns, bet tām trūkst epitēlija marķieru, piemēram, citokeratīna, kas norāda uz to stromālo izcelsmi.

Nozīmīgi pētījumi ir vērsti uz Wilms10T šūnās aktīvajiem signālu ceļiem. Proteomikas pētījumi liecina, ka šajās šūnās aktivizējas vairākas receptoru tirozīna kināzes (RTK), piemēram, IGF1R, PDGFRβ un AXL, kas, kā zināms, veicina audzēju veidošanos. Turklāt Wilms10T šūnās ir aktivizēti pakārtotie signalizācijas ceļi, tostarp MAPK un PI3K/AKT ceļi, kas veicina to agresīvo audzēja fenotipu. Visaptverošā Wilms10T raksturojuma dēļ tā ir vērtīgs modelis, lai pētītu Wilms audzēja ar pilnīgu WT1 zudumu molekulāro pamatu, kā arī lai izpētītu potenciālos terapeitiskos mērķus šajā agresīvā audzēja apakštipa gadījumā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu