Wilms10T

De Wilms10T-cellijn is afgeleid van een primair Wilms-tumormonster van een patiënt met Wilms-tumor, een pediatrisch nefroblastoom. Deze cellijn wordt gekenmerkt door een homozygote deletie van het WT1-gen, wat leidt tot een volledig verlies van de WT1-functie, een cruciaal gen dat betrokken is bij de ontwikkeling van de nieren en het behoud van een normale nierdifferentiatie. In tegenstelling tot veel andere Wilms-tumorcellijnen, ontbreekt in Wilms10T elke expressie van WT1-eiwit, wat een weerspiegeling is van de ernstige genetische veranderingen die in dit tumorsubtype aanwezig zijn. Daarnaast vertoont de Wilms10T cellijn verlies van heterozygositeit (LOH) in het 11p15 chromosomale gebied, dat belangrijke genen zoals IGF2 bevat, wat verder bijdraagt aan de tumorigene eigenschappen.

Wilms10T-cellen hebben een stabiel normaal karyotype zonder belangrijke chromosoomherschikkingen, afgezien van de specifieke deletie van de WT1-regio. Deze cellijn is uitgebreid gebruikt om de effecten van volledig WT1 verlies op de tumorbiologie te bestuderen, inclusief de invloed op celproliferatie, differentiatie en respons op verschillende signaalwegen. De cellen hebben mesenchymale kenmerken en brengen markers zoals vimentine tot expressie, terwijl epitheliale markers zoals cytokeratine ontbreken, wat duidt op hun stromale oorsprong.

Er is veel onderzoek gedaan naar de signaalroutes die actief zijn in Wilms10T cellen. Proteomische studies hebben aangetoond dat deze cellen verschillende receptor tyrosine kinases (RTK's) activeren, zoals IGF1R, PDGFRβ en AXL, waarvan bekend is dat ze tumorigenese stimuleren. Daarnaast worden downstream signaalroutes, waaronder de MAPK en PI3K/AKT routes, geactiveerd in Wilms10T cellen, wat bijdraagt aan hun agressieve tumorfenotype. De uitgebreide karakterisatie van Wilms10T maakt het een waardevol model voor het onderzoeken van de moleculaire onderbouwing van Wilms tumor met volledig WT1 verlies, evenals voor het verkennen van potentiële therapeutische doelwitten in dit agressieve tumor subtype.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring