Wilms10T

La línea celular Wilms10T se derivó de una muestra primaria de tumor de Wilms obtenida de un paciente con tumor de Wilms, un nefroblastoma pediátrico. Esta línea celular se caracteriza por una deleción homocigótica del gen WT1, lo que provoca una pérdida total de la función de WT1, un gen fundamental que interviene en el desarrollo renal y en el mantenimiento de la diferenciación renal normal. A diferencia de muchas otras líneas celulares de tumor de Wilms, la Wilms10T carece de cualquier expresión de la proteína WT1, lo que refleja las graves alteraciones genéticas presentes en este subtipo de tumor. Además, la línea celular Wilms10T presenta pérdida de heterocigosidad (LOH) en la región cromosómica 11p15, que incluye genes importantes como el IGF2, lo que contribuye aún más a sus propiedades tumorigénicas.

Las células Wilms10T presentan un cariotipo normal y estable, sin reordenamientos cromosómicos importantes, salvo la deleción específica de la región WT1. Esta línea celular se ha utilizado ampliamente para estudiar los efectos de la pérdida completa de WT1 en la biología tumoral, incluyendo su impacto en la proliferación celular, la diferenciación y la respuesta a diversas vías de señalización. Las células conservan características mesenquimales, expresando marcadores como la vimentina, mientras que carecen de marcadores epiteliales como la citoqueratina, lo que indica su origen estromal.

Se han realizado importantes investigaciones centradas en las vías de señalización activas en las células Wilms10T. Estudios proteómicos han demostrado que estas células muestran la activación de varios receptores de tirosina quinasa (RTK), como IGF1R, PDGFRβ y AXL, de los cuales se sabe que impulsan la tumorigénesis. Además, en las células Wilms10T se activan vías de señalización posteriores, incluidas las vías MAPK y PI3K/AKT, lo que contribuye a su fenotipo tumoral agresivo. La caracterización exhaustiva de Wilms10T lo convierte en un modelo valioso para investigar los fundamentos moleculares del tumor de Wilms con pérdida completa de WT1, así como para explorar posibles dianas terapéuticas en este subtipo de tumor agresivo.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.