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Wilms10T
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Wilms10T

Cell line · 제품 번호 300417

Wilms10T 세포주는 소아 신장모세포종인 윌름스 종양 환자로부터 채취한 1차 윌름스 종양 조직 샘플에서 유래되었습니다. 이 세포주는 ...

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사용자 지정 / 추천 사항

재고 있음
롯
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1

01일반 정보

설명

Wilms10T 세포주는 소아 신세포종인 윌름스 종양 환자로부터 얻은 원발성 윌름스 종양 샘플에서 추출한 것입니다. 이 세포주는 WT1 유전자의 동형 접합 결실로 인해 신장 발달과 정상적인 신장 분화 유지에 관여하는 중요한 유전자인 WT1 기능이 완전히 상실된 것이 특징입니다. 다른 많은 Wilms 종양 세포주와 달리 Wilms10T는 WT1 단백질 발현이 전혀 없는데, 이는 이 종양 아형에 존재하는 심각한 유전적 변형을 반영하는 것입니다. 또한 Wilms10T 세포주는 11p15 염색체 영역에서 이형 접합성 상실(LOH)을 보이는데, 여기에는 IGF2와 같은 중요한 유전자가 포함되어 있어 종양 유발 특성에 더욱 기여합니다.

Wilms10T 세포는 WT1 영역의 특정 결실을 제외하고는 주요 염색체 재배열이 없는 안정된 정상 핵형을 가지고 있습니다. 이 세포주는 세포 증식, 분화 및 다양한 신호 경로에 대한 반응에 미치는 영향을 포함하여 WT1의 완전한 손실이 종양 생물학에 미치는 영향을 연구하는 데 광범위하게 활용되어 왔습니다. 이 세포는 중간엽 특성을 유지하여 비멘틴과 같은 마커를 발현하는 반면, 기질 기원을 나타내는 사이토케라틴과 같은 상피 마커는 결여되어 있습니다.

윌름스10T 세포에서 활성화되는 신호 경로에 대한 중요한 연구가 진행되었습니다. 단백질체 연구에 따르면 이 세포는 종양 형성을 촉진하는 것으로 알려진 IGF1R, PDGFRβ, AXL과 같은 여러 수용체 티로신 키나제(RTK)의 활성화를 보이는 것으로 밝혀졌습니다. 또한 Wilms10T 세포에서는 MAPK 및 PI3K/AKT 경로를 포함한 다운스트림 신호 경로가 활성화되어 공격적인 종양 표현형에 기여합니다. Wilms10T의 포괄적인 특성화는 WT1이 완전히 소실된 Wilms 종양의 분자적 토대를 조사하고 이 공격적인 종양 하위 유형에서 잠재적인 치료 표적을 탐색하는 데 유용한 모델입니다.

티슈
신장
질병
윌름스 종양
응용 분야
체외 세포 배양 모델 및 생화학 연구
동의어
  • Wilms10

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
스핀들 모양
세포 유형
윌름스 세포
배가 시간
46시간

04식별자

인용
Wilms10T(사이티온 카탈로그 번호 300417)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_A5SL

05발현 및 감수성

돌연변이 프로파일
WT1 돌연변이 상태: del11p13 내 동형접합 del WT1. LOH: 11p13에는 없음, 11p15에는 UPD. CTNNB1 돌연변이 상태: 동형접합 델 TCT, p.DS45, UPD 3p

06취급 및 배양

배지
MSCGM 키트(Lonza 제공)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
4 x 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 1~2회
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
2년
민족
백인