Wilms8

Wilms8 세포주는 생식세포 WT1 돌연변이가 있는 소아 환자의 원발성 Wilms 종양에서 유래되었습니다. 이 세포주는 WT1 유전자의 동형 접합 넌센스 돌연변이(c.1168 C>T, p.R390X)로 인해 WT1 기능이 완전히 상실되는 것이 특징입니다. WT1은 정상적인 신장 발달에 매우 중요하며, 이 유전자의 비활성화는 특정 공격적인 하위 유형, 특히 중간엽 분화를 보이는 윌름스 종양에서 흔히 볼 수 있는 특징입니다. 따라서 Wilms8은 특히 뚜렷한 기질 성분으로 발생하는 Wilms 종양의 맥락에서 WT1 손실이 종양 형성에 미치는 영향을 연구하는 데 유용한 모델을 제공합니다.

WT1 돌연변이 외에도 Wilms8 세포는 Wnt 신호 경로의 핵심 조절자인 β-카테닌을 암호화하는 CTNNB1 유전자(p.S45A)에 돌연변이를 보유하고 있습니다. 세린 45의 돌연변이는 정상적인 인산화 과정을 방해하여 β-카테닌을 분해하여 핵에 안정화 및 축적을 유발합니다. 그 결과 Wnt 신호가 구성적으로 활성화되어 세포 증식을 촉진하고 Wilms8 세포주의 발암 특성에 기여합니다. Wilms8에서 WT1 손실과 비정상적인 Wnt 신호 사이의 상호 작용은 Wilms 종양 생물학에서 이러한 경로의 기초가 되는 분자 메커니즘을 이해하는 데 중요한 모델입니다.

Wilms8 세포는 비멘틴의 발현과 사이토케라틴과 같은 상피 마커의 부재를 특징으로 하는 중간엽 표현형을 나타냅니다. 이는 원래 종양에서 관찰된 기질 분화와 일치합니다. 세포는 특정 조건에서 근육과 유사한 세포를 형성하는 등 추가적인 중간엽 분화 능력이 제한적인 것으로 나타났습니다. Wilms8의 단백질체 분석을 통해 세포 생존, 이동 및 증식과 같은 주요 과정에 관여하는 PDGFRβ 및 AXL을 포함한 여러 수용체 티로신 키나제(RTK)의 활성화가 밝혀졌습니다. 다운스트림 신호 경로, 특히 MAPK 및 PI3K/AKT 경로의 활성화는 Wilms8 세포의 공격적인 특성에 더욱 기여합니다.

전반적으로 Wilms8 세포주는 WT1 손실과 비정상적인 Wnt 신호에 의해 유발되는 Wilms 종양의 분자적 기초를 조사하는 데 필수적인 도구로 사용됩니다. 이 세포주의 유전적 및 표현형적 특징은 이러한 중요한 경로 간의 상호작용을 연구하고 기질 성분이 있는 Wilms 종양에서 잠재적인 치료 표적을 식별하는 데 강력한 플랫폼이 됩니다.

37°C, 5%_CO2, 습한 대기.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

싸이티온은 제품의 품질과 생존력을 보증합니다. 당사는 당사 시설에서 배송된 후 60일 동안 배양 시작 시 세포가 생존할 수 있음을 보증합니다. 당사는 모든 재료가 분석 증명서 및/또는 제품 시트에 설명된 사양을 준수함을 보증합니다

자세한 내용은 <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">보증서 를 참조하시기 바랍니다