Wilms8

Wilms8 細胞系源自一名攜帶胚系 WT1 突變的兒童患者所患的原發性威爾姆斯腫瘤。 該細胞系的特徵在於 WT1 基因存在純合子無義突變（c.1168 C>T, p.R390X），導致 WT1 功能完全喪失。 WT1 對腎臟的正常發育至關重要，其失活是某些侵襲性威爾姆斯腫瘤亞型的共同特徵，特別是那些表現出間質分化的腫瘤。 因此，Wilms8 提供了一個寶貴的模型，用於研究 WT1 缺失對腫瘤形成的影響，特別是在具有明顯間質成分的威爾姆斯腫瘤背景下。

除了 WT1 突變外，Wilms8 細胞還攜帶 CTNNB1 基因（p.S45A）的突變，該基因編碼 Wnt 訊號傳導路徑的關鍵調節因子 β-catenin。 絲氨酸 45 位的突變會干擾導致 β-catenin 降解的正常磷酸化過程，使其在細胞核內穩定並積聚。這導致 Wnt 訊號傳導的持續活化，進而驅動細胞增殖，並促成 Wilms8 細胞系的致癌特性。 Wilms8 細胞中 WT1 缺失與異常 Wnt 訊號傳導之間的相互作用，使其成為理解威爾姆斯腫瘤生物學中這些路徑分子機制的重要模型。

Wilms8 細胞呈現間質表型，其特徵為表達維曼汀，且缺乏細胞角蛋白等上皮標記物。這與原始腫瘤中觀察到的間質分化現象相符。這些細胞展現出有限的進一步間質分化能力，例如在特定條件下形成類肌肉細胞。 對 Wilms8 的蛋白質體學分析揭示了多種受體酪胺酸激酶（RTKs）的活化，包括 PDGFRβ 和 AXL，這些激酶參與細胞存活、遷移和增殖等關鍵過程。 下游訊號傳導路徑的活化，尤其是 MAPK 和 PI3K/AKT 路徑，進一步加劇了 Wilms8 細胞的侵襲性特徵。

總體而言，Wilms8 細胞系是探究由 WT1 缺失及 Wnt 訊號傳導異常所驅動的威爾姆斯腫瘤分子基礎之重要工具。其遺傳與表型特徵，使其成為研究這些關鍵路徑之間相互作用，以及識別具有間質成分之威爾姆斯腫瘤潛在治療標靶的可靠平台。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。