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Wilms11
Tissue
腎臟
Disease
威爾姆斯腫瘤

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Wilms11

Cell line · Product number 300420

The Wilms11 cell line was derived from a primary Wilms tumor (nephroblastoma) in a pediatric patient. Unlike many other Wilms tumor cell lines, Wilms11 is...

US$800.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Wilms11 細胞系源自一名小兒患者的原發性威爾姆斯腫瘤(腎母細胞瘤)。 與許多其他威爾姆斯腫瘤細胞系不同,Wilms11 的特徵在於其攜帶野生型 WT1,這意味著該細胞系未攜帶 WT1 基因突變——此類突變通常與表現出更具侵襲性或基質表型的威爾姆斯腫瘤相關。 然而,Wilms11 腫瘤展現出顯著的基質分化,並伴有大面積的橫紋肌樣分化,這表明腫瘤內存在間質成分。野生型 WT1 的存在,加上腫瘤的基質分化,為理解缺乏 WT1 突變的威爾姆斯腫瘤生物學提供了獨特的模型。

針對 Wilms11 的遺傳學研究顯示,該細胞系攜帶 CTNNB1 基因的腫瘤特異性突變;該基因編碼的 β-catenin 在 Wnt 訊號傳導路徑中扮演關鍵角色。在 Wilms11 中,此突變影響絲氨酸 45 位點,該位點是參與 β-catenin 降解的關鍵磷酸化位點。 CTNNB1 突變導致 β-catenin 穩定化,進而引起其積聚,並使 Wnt 訊號傳導路徑持續活化,而該路徑正是細胞增殖與腫瘤形成的驅動因素。 這使得 Wilms11 成為研究 Wnt 訊號傳導與 Wilms 腫瘤發育之間相互作用的重要模型,特別是在 WT1 基因保持完整的病例中。

對 Wilms11 的蛋白質體學分析顯示,數種受體酪胺酸激酶(RTKs)已被活化,包括 PDGFRβ 和 AXL,這些激酶參與驅動腫瘤細胞的生長與存活。 下游訊號傳導路徑,例如 MAPK 和 PI3K/AKT 路徑,在 Wilms11 細胞中亦被活化,進而促進其致瘤行為。 Wilms11 細胞具有進行間質分化(尤其是橫紋肌瘤樣分化)的能力,這凸顯了其作為研究威爾姆斯腫瘤間質成分之模型的潛力。 總體而言,Wilms11 作為一種寶貴的工具,有助於探究在缺乏 WT1 突變但 Wnt 通路被活化的背景下,驅動 Wilms 腫瘤發生的分子機制。

Tissue
腎臟
Disease
威爾姆斯腫瘤
Applications
體外細胞培養模型。生化研究

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
紡錘狀
Cell type
威爾姆斯細胞

04Identifiers

Citation
Wilms11(Cytion 型號 300420)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_A5SM

05Expression and susceptibility

Mutational profile
WT1 突變狀態:WT1 c.901c>T、p.R301x 純合子。LOH:。CTNNB1 突變狀態:野生型

06Handling and culture

Culture medium
MSCGM 套組(由 Lonza 提供)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
22 個月
Ethnicity
高加索人