Wilms11

קו התאים Wilms11 נגזר מגידול Wilms ראשוני (נפרובלסטומה) בחולה ילדים. בניגוד לקווי תאים רבים אחרים של גידול Wilms, Wilms11 מאופיין בנוכחות WT1 מסוג בר, כלומר הוא אינו מכיל מוטציות בגן WT1, אשר קשורות בדרך כלל לגידולי Wilms המציגים פנוטיפים אגרסיביים יותר או סטרומליים. עם זאת, הגידול Wilms11 הפגין בידול סטרומתי משמעותי, עם אזורים נרחבים של בידול רבדומיומטי, המעידים על אלמנטים מזנכימליים בתוך הגידול. נוכחותו של WT1 מסוג בר, בשילוב עם הבידול הסטרומתי של הגידול, מספקת מודל ייחודי להבנת הביולוגיה של גידולי וילמס במקרים שבהם אין מוטציות ב-WT1.

מחקרים גנטיים של Wilms11 הראו כי קו תאים זה נושא מוטציה ספציפית לגידול ב-CTNNB1, הגן המקודד ל-β-Catenin, הממלא תפקיד מכריע במסלול האיתות Wnt. ב-Wilms11, מוטציה זו משפיעה על סרין 45, אתר פוספורילציה מרכזי המעורב בפירוק β-Catenin. המוטציה ב-CTNNB1 גורמת לייצוב של β-Catenin, מה שמוביל להצטברותו ולהפעלה קונסטיטוטבית של מסלול האיתות Wnt, המניע את התרבות התאים ואת התפתחות הגידול. זה הופך את Wilms11 למודל חשוב לחקר האינטראקציה בין איתות Wnt להתפתחות גידול וילמס, במיוחד במקרים שבהם WT1 נשאר שלם.

ניתוחים פרוטאומיים של Wilms11 חשפו הפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל PDGFRβ ו-AXL, המעורבים בהנעת צמיחת תאי הגידול והישרדותם. מסלולי איתות במורד הזרם, כגון מסלולי MAPK ו-PI3K/AKT, מופעלים גם הם בתאי Wilms11, ותורמים להתנהגותם הסרטנית. היכולת של תאי Wilms11 לעבור התמיינות מזנכמית, במיוחד התמיינות רבדומיומטית, מדגישה את הפוטנציאל שלהם כמודל לחקר המרכיבים המזנכמיים של גידול וילמס. בסך הכל, Wilms11 משמש ככלי חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים המניעים את התפתחות הגידול וילמס בהיעדר מוטציות WT1, אך בהקשר של הפעלת מסלול Wnt.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו