Wilms11

Wilms11 rakuliin on saadud pediaatrilise patsiendi primaarsest Wilmsi kasvajast (nefroblastoom). Erinevalt paljudest teistest Wilmsi kasvajate rakuliinidest on Wilms11-le iseloomulik, et selles esineb metsikut tüüpi WT1, mis tähendab, et selles ei esine mutatsioone WT1 geenis, mis tavaliselt on seotud Wilmsi kasvajatega, millel on agressiivsem või stromaalsem fenotüüp. Wilms11 kasvajal oli siiski märkimisväärne stroomaalne diferentseerumine koos suurte rabdomüoomilise diferentseerumise aladega, mis viitab mesenhüümsetele elementidele kasvajas. Metsikut tüüpi WT1 esinemine koos kasvaja stromaalse diferentseerumisega annab ainulaadse mudeli Wilmsi kasvaja bioloogia mõistmiseks juhtudel, kus WT1 mutatsioonid puuduvad.

Wilmsi11 geneetilised uuringud on näidanud, et sellel rakuliinil on kasvaja-spetsiifiline mutatsioon CTNNB1-s, mis kodeerib β-kateniini, millel on oluline roll Wnt-signaaliteedis. Wilms11 puhul mõjutab see mutatsioon seriini 45, mis on β-kateniini lagundamises osalev oluline fosforüleerimiskoht. CTNNB1 mutatsiooni tulemuseks on β-kateniini stabiliseerumine, mis põhjustab selle akumuleerumist ja Wnt-signaaltee konstitutiivset aktiveerimist, mis on rakkude proliferatsiooni ja kasvajate tekke mootoriks. See muudab Wilms11 oluliseks mudeliks Wnt-signalisatsiooni ja Wilmsi kasvaja arengu vastastikuse mõju uurimiseks, eriti juhtudel, kui WT1 jääb puutumata.

Wilms11 proteoomilised analüüsid on näidanud mitme retseptoritürosiini kinaasi (RTK), sealhulgas PDGFRβ ja AXL, aktiveerimist, mis on seotud kasvajarakkude kasvu ja ellujäämise juhtimisega. Wilms11 rakkudes on aktiveeritud ka allavoolu signaaliradasid, nagu MAPK ja PI3K/AKT, mis aitavad kaasa nende kasvajakäitumisele. Wilms11 rakkude võime läbida mesenhüümset diferentseerumist, eriti rabdomüoomset diferentseerumist, rõhutab nende potentsiaali Wilmsi kasvaja mesenhüümiliste komponentide uurimise mudelina. Kokkuvõttes on Wilms11 väärtuslik vahend Wilmsi kasvajate teket juhtivate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks WT1-mutatsioonide puudumisel, kuid Wnt-tee aktiveerimise kontekstis.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest