Wilms11

Linia komórkowa Wilms11 została uzyskana z pierwotnego guza Wilmsa (nefroblastoma) u pacjenta pediatrycznego. W przeciwieństwie do wielu innych linii komórkowych guza Wilmsa, Wilms11 charakteryzuje się obecnością WT1 typu dzikiego, co oznacza, że nie zawiera mutacji w genie WT1, co jest zwykle związane z guzami Wilmsa wykazującymi bardziej agresywne lub zrębowe fenotypy. Jednak guz Wilmsa11 wykazywał znaczne zróżnicowanie zrębu, z dużymi obszarami różnicowania rabdomiomatycznego, wskazującymi na elementy mezenchymalne w obrębie guza. Obecność WT1 typu dzikiego, w połączeniu z różnicowaniem zrębu guza, stanowi unikalny model do zrozumienia biologii guza Wilmsa w przypadkach, w których mutacje WT1 są nieobecne.

Badania genetyczne Wilms11 wykazały, że ta linia komórkowa jest nosicielem specyficznej dla guza mutacji w CTNNB1, genie kodującym β-kateninę, która odgrywa kluczową rolę w szlaku sygnałowym Wnt. W Wilms11 mutacja ta wpływa na serynę 45, kluczowe miejsce fosforylacji zaangażowane w degradację β-kateniny. Mutacja CTNNB1 powoduje stabilizację β-kateniny, prowadząc do jej akumulacji i konstytutywnej aktywacji szlaku sygnałowego Wnt, będącego czynnikiem napędzającym proliferację komórek i nowotworzenie. To sprawia, że Wilms11 jest ważnym modelem do badania interakcji między sygnalizacją Wnt a rozwojem guza Wilmsa, szczególnie w przypadkach, w których WT1 pozostaje nienaruszony.

Analizy proteomiczne Wilms11 ujawniły aktywację kilku receptorowych kinaz tyrozynowych (RTK), w tym PDGFRβ i AXL, które są zaangażowane w napędzanie wzrostu i przeżycia komórek nowotworowych. Szlaki sygnałowe, takie jak MAPK i PI3K/AKT, są również aktywowane w komórkach Wilms11, przyczyniając się do ich zachowania nowotworowego. Zdolność komórek Wilms11 do różnicowania mezenchymalnego, w szczególności różnicowania rabdomiomatycznego, podkreśla ich potencjał jako modelu do badania mezenchymalnych składników guza Wilmsa. Ogólnie rzecz biorąc, Wilms11 służy jako cenne narzędzie do badania mechanizmów molekularnych, które napędzają nowotwór Wilmsa przy braku mutacji WT1, ale w kontekście aktywacji szlaku Wnt.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym