Wilms11

Buněčná linie Wilms11 byla odvozena z primárního Wilmsova nádoru (nefroblastomu) u dětského pacienta. Na rozdíl od mnoha jiných buněčných linií Wilmsova nádoru je Wilms11 charakterizována přítomností divokého typu WT1, což znamená, že neobsahuje mutace v genu WT1, které jsou obvykle spojeny s Wilmsovými nádory vykazujícími agresivnější nebo stromální fenotyp. Nádor Wilms11 však vykazoval výraznou stromální diferenciaci s velkými oblastmi rabdomyomatózní diferenciace, což svědčí o mezenchymálních prvcích v nádoru. Přítomnost divokého typu WT1 spolu se stromální diferenciací nádoru poskytuje jedinečný model pro pochopení biologie Wilmsova nádoru v případech, kdy mutace WT1 chybí.

Genetické studie Wilmsova nádoru11 ukázaly, že tato buněčná linie nese nádorově specifickou mutaci v CTNNB1, genu kódujícím β-katenin, který hraje klíčovou roli v signální dráze Wnt. U Wilms11 tato mutace postihuje serin 45, klíčové fosforylační místo, které se podílí na degradaci β-Cateninu. Mutace CTNNB1 vede ke stabilizaci β-Cateninu, což vede k jeho akumulaci a konstitutivní aktivaci signální dráhy Wnt, která je hnací silou buněčné proliferace a tumorigeneze. Díky tomu je Wilms11 důležitým modelem pro studium vzájemného působení signalizace Wnt a vývoje Wilmsova nádoru, zejména v případech, kdy WT1 zůstává intaktní.

Proteomické analýzy Wilms11 odhalily aktivaci několika receptorových tyrozinkináz (RTK), včetně PDGFRβ a AXL, které se podílejí na řízení růstu a přežívání nádorových buněk. V buňkách Wilms11 jsou rovněž aktivovány navazující signální dráhy, například dráhy MAPK a PI3K/AKT, což přispívá k jejich nádorovému chování. Schopnost buněk Wilms11 procházet mezenchymální diferenciací, zejména rabdomyomatózní diferenciací, zdůrazňuje jejich potenciál jako modelu pro studium mezenchymálních složek Wilmsova nádoru. Celkově lze říci, že buňky Wilms11 slouží jako cenný nástroj pro zkoumání molekulárních mechanismů, které řídí Wilmsův tumor v nepřítomnosti mutací WT1, ale v kontextu aktivace dráhy Wnt.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení