Wilms2

Buněčná linie Wilms2 byla odvozena z primárního Wilmsova nádoru u dětského pacienta se zárodečnou mutací WT1. Tato buněčná linie je charakterizována homozygotní nonsense mutací v genu WT1 (c.1084 C>T, p.R362X), která vede k produkci zkráceného, nefunkčního proteinu WT1. Ztráta funkčního WT1, genu nezbytného pro vývoj ledvin, je charakteristickým znakem některých podtypů Wilmsova nádoru, zejména těch, které jsou spojeny s mezenchymální nebo stromální diferenciací. Buněčná linie Wilms2 je významným modelem pro studium nádorových procesů způsobených ztrátou WT1, zejména v kontextu Wilmsových nádorů, které si zachovávají další kritické genetické vlastnosti.

Buňky Wilms2 nesou také mutace v genu CTNNB1, který kóduje β-Catenin, klíčovou složku signální dráhy Wnt. Tyto mutace, konkrétně postihující serin 45, vedou ke stabilizaci a akumulaci β-Cateninu, což má za následek konstitutivní aktivaci dráhy Wnt. Tato aktivace je známou hnací silou buněčné proliferace a tumorigeneze u Wilmsova nádoru, což z Wilms2 činí cenný model pro pochopení toho, jak aberantní signalizace Wnt přispívá k rozvoji a progresi nádorů s mutacemi WT1.

Co se týče fenotypu, buňky Wilms2 vykazují morfologii podobnou mezenchymální, exprimují vimentin a postrádají epiteliální markery, jako je cytokeratin. To odpovídá stromálním charakteristikám nádoru a podtrhuje úlohu WT1 v regulaci mezenchymálně-epiteliálních přechodů během vývoje ledvin. Proteomické analýzy Wilms2 identifikovaly aktivaci několika receptorových tyrozinkináz (RTK), včetně PDGFRβ a AXL, o nichž je známo, že podporují přežívání a proliferaci nádorových buněk. Kromě toho jsou aktivovány i navazující dráhy, jako jsou MAPK a PI3K/AKT, což dále přispívá k maligním vlastnostem buněk Wilms2.

Celkově buněčná linie Wilms2 slouží jako základní nástroj pro zkoumání molekulárních mechanismů Wilmsova nádoru způsobeného ztrátou WT1 a aberantní signalizací Wnt. Její genetické a fenotypové charakteristiky poskytují robustní platformu pro zkoumání potenciálních terapeutických cílů a pro pochopení úlohy klíčových signálních drah v patologii Wilmsových nádorů s mezenchymální složkou.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení